• membrána microvesicles
• sérum
• plazmové
• koagulace
• lupus

Jsme si s velkým zájmem přečetl článek o Kato a jeho kolegové o ‚Apoptózy-odvozené membránových váčků řídit veličina cgas–STING dráhy a zlepšit typ I IFN výroby v systémový lupus erythematodes‘.,1 máme však obavy, že autoři studovali výhradně krevní sérum, to znamená, že všechny vzorky krve od svých pacientů s lupusem a zdravými kontrolami byly před analýzou koagulovány ex vivo.

během koagulace ve zkumavce mohou nastat nejméně tři hlavní změny v populaci membránových mikrovesicles (MVs). Za prvé, podmnožina cirkulujících MVs se účastní a stává se konzumována srážením., Například studie z naší skupiny a jiné uvedeno, že více než polovina z celkového membrány MVs v krvi plasma2 nebo in vitro vytvořené MVs3 4 zobrazení fosfatidylserinu (PS) na jejich povrchu. PS-pozitivní MV jsou prokoagulační vzhledem k těm, které jsou PS negative2 3 5, protože PS tvoří povrch katalytické membrány, který podporuje montáž a katalýzu komplexů koagulačních faktorů.3 6 platí to zejména pro apoptotické MVs, 3 5 7 8 protože povrchová expozice membrány PS je charakteristickým znakem buněčné apoptózy.,9 Při odběru krve bez antikoagulancií by tedy PS-pozitivní MVs mohla být přednostně zapojena do tvorby sraženin ve vzorkovací zkumavce. Zbývající MV v sérové zkumavce nemusí být reprezentativní pro původní populaci MVs, která byla v oběhu.4

druhá změna během srážení ex vivo je generování nové populace MVs, které byly původně prezentovány v oběhu. Destičky se aktivují během tvorby sraženin ve zkumavce a během procesu odběru vzorků uvolňují uměle vytvořené MVs in vitro.,10 mV odvozených od krevních destiček generovaných ve zkumavce vzorku může představovat 50% mV v séru.10 dalších buněk v krvi může také uvolňovat MVs během srážení ex vivo. Tyto „umělé“ MV v séru nemohou představovat patofyziologický stav cirkulující krve u pacientů s lupusem a zdravými kontrolami.

třetí změnou během srážení je možné štěpení proteinů na MV proteázami, tj. trombinem generovaným během koagulační kaskády. Tento problém nebyl široce studován v oblasti výzkumu MV, ale je znám v jiných oblastech., Například trombin tráví apolipoprotein-B na fragmenty, 11 a „intaktní“ lipoproteiny jsou izolovány z plazmy, nikoli ze séra.

podle našeho názoru, krev plasma12 připravené v přítomnosti antikoagulancií – by měly být použity v MV výzkum, protože to se vyhne spotřebu původní cirkulující‘ MVs, a výroba „umělého“ MVs, jakož i působení proteázy, během srážení ex vivo v sérových zkumavkách. Výsledky studie se sérem, které používá Kato et al a další skupiny, by však měly být potvrzeny krevní plazmou., Artefakty způsobené srážení krve ve zkumavce může do značné míry ovlivnit výsledky a závěry všech studií cirkulující membrány MVs v klinických translační vyšetřování. Proto je odběr vzorků krve cirkulující membrány MVs u lidských subjektů důležitým bodem, který je třeba objasnit mezi vyšetřovateli, kteří provádějí klinické translační výzkumy.