• Membranmikrovesikel
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• Koagulation
• Lupus

Wir haben mit großem Interesse den Artikel von Kato und Kollegen über die von Apoptose abgeleiteten Membranvesikel gelesen, die den cGAS-STING–Weg antreiben und die IFN-Produktion von Typ I bei systemischem Lupus erythematodes“.,1 Wir sind jedoch besorgt, dass die Autoren ausschließlich Blutserum untersucht haben, dh alle Blutproben ihrer Patienten mit Lupus und gesunden Kontrollen wurden vor der Analyse ex vivo koaguliert.

Mindestens drei wesentliche Veränderungen können bei der Population von Membranmikrovesikeln (MVs) während der Koagulation in einem Reagenzglas auftreten. Erstens nimmt eine Teilmenge zirkulierender MVs an der Gerinnung teil und wird von ihnen konsumiert., Zum Beispiel zeigten Studien aus unserer Gruppe und anderen, dass über die Hälfte der gesamten Membran-MVs in Blutplasma2 oder dem in vitro erzeugten MVs3 4 Phosphatidylserin (PS) auf ihrer Oberfläche anzeigen. PS-positive MVs sind Prokoagulans relativ zu denen, die PS negativ sinde2 3 5 weil PS eine katalytische Membranoberfläche bildet, die die Montage und Katalyse von Gerinnungsfaktorkomplexen fördert.3 6 Dies gilt insbesondere für apoptotische MVs, 3 5 7 8, da die Membranoberflächenexposition von PS ein Kennzeichen der Zellapoptose ist.,9 Somit könnten PS-positive MVs bevorzugt an der Gerinnselbildung im Probenahmer beteiligt sein, wenn Blut ohne Antikoagulanzien entnommen wird. Die verbleibenden MVs in der Serumröhre sind möglicherweise nicht repräsentativ für die ursprüngliche Population von MVs, die sich im Kreislauf befanden.4

Eine zweite Veränderung während der Gerinnung ex vivo ist die Erzeugung einer neuen Population von MVs, die ursprünglich nicht im Kreislauf präsentiert wurden. Thrombozyten werden während der Gerinnselbildung in einem Reagenzglas aktiviert und setzen künstlich erzeugte MVs in vitro während des Probenahmevorgangs frei.,10 Blutplättchen-abgeleitete MVs, die im Probenröhrchen erzeugt werden, können 50% der MVs im Serum ausmachen.10 Andere Zellen im Blut können auch MVs während der Ex-vivo-Gerinnung freisetzen. Diese „künstlichen“ MVs im Serum können den pathophysiologischen Zustand des zirkulierenden Blutes bei Patienten mit Lupus und gesunden Kontrollen nicht darstellen.

Eine dritte Veränderung während der Gerinnung ist die mögliche Spaltung von Proteinen auf MVs durch Proteasen, dh Thrombin, die während der Gerinnungskaskade erzeugt werden. Dieses Problem wurde im Forschungsbereich nicht umfassend untersucht, ist aber in anderen Bereichen bekannt., Zum Beispiel verdaut Thrombin Apolipoprotein-B in Fragmente, 11 und die „intakten“ Lipoproteine werden aus Plasma und nicht aus Serum isoliert.

Unserer Meinung nach sollte Blutplasma12, das in Gegenwart von Antikoagulanzien hergestellt wird, in der MV-Forschung verwendet werden, da es den Verbrauch der „ursprünglichen zirkulierenden“ MVs und die Produktion der „künstlichen“ MVs sowie die Exposition gegenüber Proteasen während der Gerinnung von ex vivo in den Serumprobenröhrchen vermeidet. Die Studienergebnisse mit Serum, wie sie von Kato et al und anderen Gruppen verwendet werden, sollten jedoch mit Blutplasma bestätigt werden., Artefakte, die durch die Blutgerinnung in einem Reagenzglas verursacht werden, können die Ergebnisse und Schlussfolgerungen von Studien zu zirkulierenden Membran-MVs in klinischen translationalen Untersuchungen weitgehend beeinflussen. Daher ist die Blutentnahme der zirkulierenden Membran-MVs bei menschlichen Probanden ein wichtiger Punkt, der bei den Forschern geklärt werden muss, die klinische Translationsuntersuchungen durchführen.