• membraanmicrovesikels
• serum
• plasma
• coagulatie
• lupus

We hebben met grote belangstelling het artikel gelezen van Kato en collega ’s over de” apoptose-afgeleide membraanblaasjes drijven de cgas–STING route en versterken de type I IFN productie in systemische lupus erythematosus”.,1 Wij zijn echter bezorgd dat de auteurs uitsluitend bloedserum hebben bestudeerd, dat wil zeggen dat alle bloedmonsters van hun patiënten met lupus en gezonde controles ex vivo zijn gecoaguleerd vóór de analyse.

ten minste drie belangrijke veranderingen kunnen optreden in de populatie van membraanmicrovesikels (MVs) tijdens de coagulatie in een reageerbuis. Ten eerste neemt een subset van circulerende MVs deel aan, en wordt verbruikt door, stolling., Bijvoorbeeld, studies van onze groep en anderen toonden aan dat meer dan de helft van het totale membraanmembraan MVs in bloed plasma2 of de in vitro gegenereerde mvs3 4 fosfatidylserine (PS) op hun oppervlak vertonen. PS-positieve MV ‘ s zijn procoagulant ten opzichte van PS-negatieve2 3 5 omdat PS een katalytisch membraanoppervlak vormt dat de assemblage en katalyse van stollingsfactorcomplexen bevordert.3 6 Dit geldt met name voor apoptotische MVs,3 5 7 8 aangezien blootstelling aan het membraanoppervlak van PS Een kenmerk is van celapoptosis.,Daarom kunnen PS-positieve MV ‘ s bij voorkeur betrokken zijn bij de vorming van stolsels in de bemonsteringsbuis wanneer bloed wordt afgenomen zonder anticoagulantia. De resterende MV ’s in de serumbuis zijn mogelijk niet representatief voor de oorspronkelijke populatie van MV’ s die in de circulatie waren.4

een tweede verandering tijdens stolling ex vivo is het ontstaan van nieuwe populatie MV ‘ s die oorspronkelijk niet in de circulatie werden gepresenteerd. Bloedplaatjes worden geactiveerd tijdens de vorming van stolsels in een reageerbuis en geven in vitro kunstmatig gegenereerde MVs vrij tijdens het bemonsteringsproces.,10 bloedplaatjes-afgeleide MVS gegenereerd in de monsterbuis kan verantwoordelijk zijn voor 50% van de MVS in serum.10 andere cellen in het bloed kunnen ook MVS afgeven tijdens de ex vivo stolling. Deze ‘kunstmatige’ MV ‘ s in serum kunnen niet de pathofysiologische conditie van het circulerende bloed vertegenwoordigen bij patiënten met lupus en gezonde controles.

een derde verandering tijdens de stolling is de mogelijke splitsing van eiwitten op MVs door proteasen, dat wil zeggen trombine, gegenereerd tijdens de stollingscascade. Dit probleem is niet op grote schaal bestudeerd in het onderzoeksgebied van MV, maar het is bekend op andere gebieden., Trombine verteert bijvoorbeeld apolipoproteïne-B in fragmenten, 11 en de ‘intacte’ lipoproteïnen worden geïsoleerd uit plasma, niet uit serum.

naar onze mening moet bloedplasma12, bereid in aanwezigheid van anticoagulantia, worden gebruikt in onderzoek naar MV, omdat het gebruik van de “oorspronkelijke circulerende” MV ’s en de productie van de “kunstmatige ” MV’ s vermijdt, evenals blootstelling aan proteasen, tijdens stolling ex vivo in de serummonsterbuisjes. Maar de studieresultaten met serum, zoals gebruikt door Kato et al en andere groepen, moeten worden bevestigd met bloedplasma., Artefacten veroorzaakt door de stolling van bloed in een reageerbuis kunnen de resultaten en conclusies van alle studies van circulerende MVS in klinische translationele onderzoeken grotendeels beïnvloeden. Daarom is de bloedbemonstering van het circulerende MVS membraan bij menselijke proefpersonen een belangrijk punt dat onder de onderzoekers die klinische translationele onderzoeken uitvoeren moet worden verduidelijkt.