vergelijking van RPR en ELISA met TPHA voor de diagnose van syfilis: implicatie voor het bijwerken van syfilis Point-Of-Care Tests in Ethiopië
Abstract
Achtergrond. Syfilis is een seksueel overdraagbare ziekte (SOA) veroorzaakt door de spirochete Treponema pallidum, en het blijft een groot volksgezondheidsprobleem in Afrika, waaronder Ethiopië. Syfilis diagnose wordt gemaakt door ofwel nontreponemal of treponemal benaderingen, hoewel in ontwikkelingslanden de diagnose berust meestal op niet-specifieke tests toe te schrijven aan verschillende redenen., Het doel van deze studie was dus het beoordelen van de gevoeligheid, specificiteit, voorspellende waarden en overeenstemming van rapid plasma reagens (RPR) en enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) met Treponema pallidum hemagglutination assay (TPHA) als een gouden standaard voor de diagnose van syfilis. Resultaat. De gevoeligheid, specificiteit en positieve en negatieve voorspellende waarden van ECOTEST-RPR waren respectievelijk 100%, 80,8%, 76,2% en 100%. De gevoeligheid, specificiteit en positieve en negatieve voorspellende waarden van DIALAB-ELISA waren echter respectievelijk 98,4%, 94,9%, 92,3% en 98,9%., De overeenkomst tussen DIALAB-ELISA en Randox-TPHA was uitstekend (kappa-waarde: 0,96) in vergelijking met ECOTEST-RPR en Randox-TPHA-assay (kappa-waarde: 0,88). Conclusie. We vonden een karakteristiek variabele prestatie van de DIALAB-ELISA test en de momenteel beschikbare traditionele ECOTEST-RPR test in het studiegebied. Het gebruik van ECOTEST-RPR als diagnostische test wordt geconfronteerd met zijn valse positiviteit. Noch de ECOTEST-RPR, noch de DIALAB-ELISA-test is als zodanig geschikt om te worden gebruikt als screening-of bevestigingstest voor syfilisdiagnose., Daarom moeten grondige studies worden uitgevoerd met het oog op een wijziging van het huidige diagnosesysteem in de gemeenschap.
1. Achtergrond
syfilis is een seksueel overdraagbare aandoening (SOA) veroorzaakt door de spirochete Treponema pallidum (T. pallidum) die kan worden verspreid door seksueel contact, door bloedtransfusie en via verticale transmissie . Syfilis treft 12 miljoen mensen per jaar en resulteert in significante morbiditeit zo niet mortaliteit. In Afrika bezuiden de Sahara blijft syfilis een ernstig probleem voor de volksgezondheid. De prevalentie van actieve syfilisinfectie onder Afrikaanse landen vertoonde 12.,8% in Tanzania en Kenia . Maar de omvang van syfilis onder bloeddonoren in Gondar (Ethiopië) was 1,3% in 2010 .de diagnose syfilis kan op verschillende manieren worden gesteld. Naast de serologische diagnostische standaardmethode is de donkerveldmicroscopie waarbij de spirocheet wordt onderzocht en waargenomen van de laesie onder donkerveldmicroscoop ook een andere methode . T., pallidum, het etiologische agens van syfilis, produceert ten minste twee soorten antilichamen bij humane infecties: treponemale antilichamen die kunnen worden gedetecteerd door fluorescerende treponemale antilichaam absorptie (FTA-ABS) en nontreponemal antilichaam (reagens) die kunnen worden gedetecteerd door RPR-antigeenkaart of VDRL-test. Niet-reponemale tests zoals het venerische ziekte onderzoek laboratorium (VDRL) en rapid plasma reagens (RPR) zijn gebaseerd op de reactie van cardiolipine met niet-specifieke antilichamen geproduceerd in reactie op syfilitische infectie ., Nochtans, ontbreekt deze test gevoeligheid en specificiteit toe te schrijven aan verscheidene redenen met inbegrip van zwangerschap, auto-immune wanorde, besmettingen, en stadia van syfilisbesmetting . Daarom worden treponemal-specifieke tests zoals enzyme immunoassay (EIA), T. pallidum hemagglutination assay (TPHA), microhemagglutination, fluorescente treponemal antilichaam absorptie test (FTA-abs), en de enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) die IgG antilichamen tegen antigene componenten van T. pallidum detecteren voornamelijk gebruikt om de diagnose van syfilis bij patiënten met een reactieve niet-reponemal test te bevestigen ., Ondanks de beschikbaarheid van relatief gevoelige tests en betaalbare behandeling, blijft de ziekte een wereldwijd gezondheidsprobleem .
syfilis blijft een belangrijke oorzaak van reproductieve morbiditeit en slechte zwangerschapsuitkomsten in ontwikkelingslanden, waaronder Ethiopië. Bij 80% van de geïnfecteerde zwangere vrouwen resulteert dit in doodgeboorte en spontane abortus( 40%), perinatale dood (20%), en ernstige neonatale infecties en baby ‘ s met een laag geboortegewicht (20%). Syfilis heeft ook een nieuw potentieel voor morbiditeit en mortaliteit verworven door een associatie met een verhoogd risico op HIV-infectie .,
Screening van zwangere vrouwen, bloeddonoren en maatschappelijk werkers (bestuurders en nieuw aangeworven sociaal werkers) op syfilis is een routine activiteit bij alle zorginstellingen in Ethiopië. Voor dit doel, als gevolg van kosteneffectiviteit, RPR die twijfelachtige testprestaties heeft wordt meestal gebruikt als een screening tool in Ethiopië. Ondanks rapporten van de fabrikanten over de diagnostische prestaties blijven de gegevens over de testprestaties van RPR in het onderzoeksgebied echter beperkt., Dus, het doel van deze studie was om de gevoeligheid, specificiteit, voorspellende waarden, en de Overeenkomst van ECOTEST-RPR en DIALAB-ELISA met Randox-TPHA assay te beoordelen als een gouden standaard voor syfilis diagnose onder syfilis verdachte patiënten die het University Of Gondar Hospital (UGH), Noordwest Ethiopië.
2. Methoden
2.1. Studieopzet, periode en gebied
Facility-based transversale studie werd uitgevoerd in UGH, van November 2015 tot juni 2016., De Universiteit van Gondar ziekenhuis is een van de pionier onderwijs ziekenhuizen in Ethiopië, gelegen in Amhara regio, Noordwest-Ethiopië. Het ziekenhuis heeft acht verschillende laboratoriumsecties, waaronder serologie, die onderwijs -, diagnostische en onderzoeksdiensten biedt voor de universitaire gemeenschap, Gondar stadsbewoners en de nabijgelegen Woreda-populaties.
2.2. Deelnemers aan het onderzoek
na het verkrijgen van informed consent werden in totaal 160 deelnemers aan dit onderzoek opgenomen., Van hen, 80 deelnemers werden gediagnosticeerd als positief voor syfilis infectie door de routinematig gebruikte techniek in het studiegebied (ECOTEST-RPR) aan de Universiteit van Gondar Teaching hospital Laboratory. Grafieken van alle patiënten werden beoordeeld om te bepalen of met specifieke therapie werd begonnen. Ook, 80 blijkbaar gezonde individuen die geen geschiedenis van seksueel overdraagbare aandoeningen hebben werden gerekruteerd uit Gondar Blood Bank Center.
2.3., Monsterinzameling en verwerking
bloedmonster werd bij elke deelnemer verzameld en gecentrifugeerd totdat het serum werd gescheiden, en sera werden bewaard bij -20°C totdat de laboratoriumtests werden uitgevoerd. Alvorens RPR, ELISA, en TPHA uit te voeren, werden de opgeslagen serummonsters ontdooid bij 37°C in een waterbad tot het gevormde ijs volledig wordt opgelost. Daarna werden RPR, ELISA en TPHA gedaan en werden de resultaten bereikt volgens de instructies van de fabrikant van de kit. Een specimen dat een dubbelzinnig resultaat toont voor een van de tests werd opnieuw getest., Dit onderzoek werd uitgevoerd volgens de Standards for Reporting Diagnostic Accuracy Studies (STARD) essential items for reporting diagnostic accuracy studies (http://www.equator-network.org/reporting-guidelines/stard).
2.3.1. ECOTEST-RPR
het antigeen dat in de ecotest-RPR (Assure Tech, Hangzhou, China) kit wordt gebruikt, is een modificatie van VDRL-antigeen, dat microparticulate houtskool bevat om het visuele verschil tussen een positief en een negatief resultaat te vergroten., Patiënt sera gemengd met een fijn deeltje cardiolipine antigeen dat is versterkt met cholesterol, lecithine en houtskool zal resulteren in een macroscopisch zichtbare flocculatie-type precipitatie als het serum van de patiënt reacin bevat—een antilichaam gevormd tegen cardiolipine (de gedetailleerde procedure kan worden geraadpleegd uit de instructie van de fabrikant, Assure Tech, Hangzhou, China.,) Interpretatie voor elke test werd gedaan met behulp van controles (positief en negatief) volgens de instructies van de fabrikant als reactief (R), als klonteren wordt gezien, of niet—reactieve (NR) – gladde suspensie, geen klonteren, of lichte ruwheid.
2.3.2. De DIALAB-syfilis IgG / IgM ELISA
met behulp van de enzyme linked method (Elisa) van het antigeen sandwich kan deze syfilis IgG/IgM ELISA-test (DIALAB, Duitsland) anti-TP-antilichamen detecteren. Microwellstrips van polystyreen worden vooraf gecoat met recombinant Treponema pallidum-antigenen geproduceerd in E. coli., Recombinant TP-antigenen die zijn geconjugeerd aan mierikswortelperoxidase (HRP) conjugaat worden geïncubeerd in de microwells met het monster. De vooraf gecoate antigenen wijzen op dezelfde epitopen zoals de HRP-geconjugeerde antigenen, maar de gastheren zijn verschillend. Als anti-TP aanwezig is in het monster tijdens incubatie, zullen de geconjugeerde en precoate antigenen worden gebonden aan de twee-variabele antilichaamdomeinen, en wat op de vaste fase wordt gevangen is het specifieke antilichaamantigeen-immunocomplex., Het is belangrijk dat chromogeenoplossingen die tetramethylbenzidine (TMB) en ureumperoxide bevatten, na de wasfase in de putjes worden toegevoegd om monster-en ongebonden conjugaten te verwijderen. De kleurloze chromogenen worden gehydrolyseerd door het gebonden HRP-conjugaat aan een blauwgekleurd product wanneer het antigeen-antilichaam-antigeen sandwichcomplex aanwezig is. Op dit punt wordt de blauwe kleur geel. Dit gebeurt nadat de reactie met zwavelzuur is gestopt. Wat proportioneel op dit kruispunt kan worden gemeten is de hoeveelheid antilichaam in de steekproef met de hoeveelheid kleur., Kleurloze putten wijzen op negatieve anti-TP monsters (de gedetailleerde procedure kan worden geraadpleegd uit de instructies van de fabrikant, DIALAB, Duitsland.)
(1) interpretatie van resultaten. Elke microplaat moet afzonderlijk worden overwogen bij het berekenen en interpreteren van de resultaten van de assay, ongeacht het aantal gelijktijdig verwerkte platen. De resultaten worden berekend door de optische dichtheid (od) van elk monster te relateren aan de afkapwaarde (CO) van de plaat., Als de afkapwaarde is gebaseerd op een plaatlezer met één filter, moeten de resultaten worden berekend door de od-waarde van de blanco-put in mindering te brengen op de waarden voor het afdrukrapport van monsters en controles. Indien de aflezing is gebaseerd op een dubbelfilterplaatlezer, trek de OD van de blanco-put niet af van de waarden voor het afdrukrapport van monsters en controles.
2.3.3. Randox TPHA
tpha (Randox Laboratories, UK) reagentia worden gebruikt om humaan serumantilichaam tegen T. pallidum op te sporen door middel van een indirecte hemagglutinatie (IHA) methode., Geconserveerde erytrocyten van vogels zijn bedekt met antigene componenten van pathogene T. pallidum (Nichols stam). Deze testcellen agglutineren in aanwezigheid van specifieke antilichamen tegen T. pallidum en vertonen karakteristieke patronen in microtitratieplaten. Eventuele niet-specifieke reacties worden gedetecteerd met behulp van de controlecellen, die aviaire erytrocyten zijn, niet bedekt met T. pallidum-antigenen. Niet-specifieke reacties kunnen ook worden geabsorbeerd uit het gebruik van deze controlecellen. Antilichamen tegen nietpathogene treponemes worden geabsorbeerd door een extract van Reiter ‘ s treponemes, opgenomen in de celsuspensie., Testresultaten worden verkregen in 45-60 minuten en de celagglutinatiepatronen zijn zowel gemakkelijk af te lezen als langdurig. (De gedetailleerde procedure kan worden geraadpleegd vanuit de instructies van de fabrikant, Randox Laboratories, UK.)
(1) interpretatie van de resultaten. Wanneer de testput positief is, moet de controleput worden geobserveerd. De controlecellen moeten zich vestigen op een compacte knop. Zij mogen niet worden gebruikt als vergelijking voor niet-reactieve serumpatronen, aangezien de controlecellen een compacter patroon zullen geven dan de testcellen., Agglutinatie in de controleput wijst op de aanwezigheid van niet-specifieke agglutininen in het monster; de test moet als ongeldig worden gerapporteerd. Een serum dat dit resultaat geeft, kan worden geabsorbeerd met behulp van de controlecellen zoals beschreven onder niet-specifieke absorptie. Een twijfelachtige reactie met testcellen moet als onbepaald worden gerapporteerd.
2.4. Statistische analyse
de gegevens werden opgeschoond en dubbel ingevoerd op een Excel-Spreadsheet en getransporteerd naar SPSS-versie 20., JavaStat two-way contingency table analysis software (http://statpages.org/ctab2x2.html) werd ook gebruikt om de gevoeligheid, specificiteit en voorspellende en kappa waarden te berekenen. De testresultaten van ECOTEST-RPR en DIALAB-ELISA werden vergeleken met de resultaten van de referentiemethode (Randox-TPHA). De kappa-waarde werd bepaald om de overeenkomst tussen ECOTEST-RPR, DIALAB-ELISA en Randox-TPHA te evalueren.
3. Resultaten
in totaal waren 160 deelnemers betrokken bij deze studie. 80 (50%) van hen werden gediagnosticeerd met syfilis met behulp van RPR als diagnostische test in het studiegebied., Echter, 80 (50%) van hen waren ogenschijnlijk gezonde deelnemers en waren negatief voor syfilis door alle soorten tests (ECOTEST-RPR, DIALAB-ELISA, en Randox-TPHA). De leeftijdscategorie van de deelnemers lag tussen 20 en 52 jaar, en de meeste van hen (77%) waren tussen 22 en 32 jaar. Onder de deelnemers waren 84 (52,5%) mannen en 76 (47,5%) vrouwen. De meeste proefpersonen (107, 66,9%) kwamen uit plattelandsgebieden van de nabijgelegen inwoners, en 53 (33,1%) van de proefpersonen waren stedelijke bewoners (Tabel 1)., Van de 40 patiënten bij wie bij de RPR-test syfilis werd vastgesteld, hadden 2 patiënten primaire syfilis en 9 patiënten secundaire syfilis met klinische presentatie van nonitchy maculopapulaire uitslag, condyloma lata en gegeneraliseerde lymfadenopathie, terwijl de klinische gegevens van de overige RPR-positieve patiënten niet volledig gedocumenteerd waren in de medische grafieken.
de gevoeligheid, specificiteit en voorspellende waarden van ECOTEST-RPR en DIALAB-ELISA in deze studie werden geëvalueerd met behulp van Randox-TPHA als gouden standaard voor de diagnose van syfilis., De gevoeligheid en specificiteit van ECOTEST-RPR voor syfilisdetectie waren dus respectievelijk 100 en 80,8%. De positieve voorspellende waarde (PPV) en de negatieve voorspellende waarde (NPV) waren respectievelijk 76,2 en 100%. De overeenkomst tussen Randox-TPHA en ECOTEST-RPR-tests was goed met een kappa-waarde van 0,88 (Tabel 2).
bovendien waren de gevoeligheid en specificiteit van DIALAB-ELISA voor syfilisdetectie respectievelijk 98,4 en 94,9%. De positieve voorspellende waarde (PPV) en de negatieve voorspellende waarde (NPV) waren respectievelijk 92,3 en 98,9%., De overeenkomst tussen TPHA en ELISA-tests was bijna perfect met een kappa-waarde van 0,96 (Tabel 3).
in deze studie hebben we de medische grafieken van elke deelnemer herzien en vonden we dat alle ECOTEST-RPR-positieve patiënten begonnen waren met geschikte medicatie. Bovendien vonden we twee monsters met onduidelijke Testresultaten voor DIALAB-ELISA, maar heranalyse van deze monsters door DIALAB-ELISA en Randox-TPHA levert een positief resultaat op bij beide tests. Ook rapporteerden we 15 afwijkende resultaten (d.w.z., ECOTEST-RPR-positief maar DIALAB-ELISA-negatief) als negatief resultaat na heranalyse en geverifieerd als negatief door Randox-TPHA.
4. Discussie
Syfilisinfectie kan worden gediagnosticeerd met behulp van de treponemale of de nontreponemale benadering. De technieken van de neic zure versterking (NAAT) zoals polymerasekettingreactie (PCR) hebben de weg voor de ontwikkeling van hoogst gevoelige en specifieke punt-van-zorg tests geopend., Niettemin is het gebruik van Naat-methoden in ontwikkelingslanden beperkt vanwege hun betaalbaarheid en kosten en de complexiteit van de technieken die door de bestaande menselijke hulpbronnen op diagnostische gebieden moeten worden gebruikt. Daarnaast is een definitieve syfilitische diagnostische test op basis van de detectie van Treponema-specifieke IgG beschikbaar gesteld. Nochtans, is een niet-reponemal techniek zoals RPR de wijdst gebruikte met inbegrip van het studiegebied, hoewel het onbetrouwbaar is aangezien een positief resultaat niet noodzakelijk treponemal besmetting aangeeft., De toepassing ervan bij de screening van bloeddonoren, zwangere vrouwen en maatschappelijk werkers is dus ter discussie gesteld. Daarom beoordeelden we de prestaties van ECOTEST-RPR en DIALAB-ELISA assay met Randox-TPHA als referentie standaard diagnostische test voor syfilis.
in de huidige studie waren de totale gevoeligheid en specificiteit van ECOTEST-RPR in vergelijking met Randox-TPHA respectievelijk 100% en 80,8%. In onze studie waren de gevoeligheid en specificiteit van RPR vergelijkbaar met de bevindingen uit Portugal, Korea en Nepal ., De gevoeligheid alleen was echter veel hoger in vergelijking met rapporten uit verschillende studies . De hoogste (100%) gevoeligheid in onze bevinding zou kunnen zijn als volgt: Ten eerste, onze deelnemers kunnen niet alleen syfilis infectie, suggereren kruisreactiviteit van ECOTEST-RPR met cholesterol, lecithine, en cardiolipine antigenen gevonden in andere ziekteprocessen als gevolg van cellulaire vernietiging., Ten tweede kan het ook te wijten zijn aan variatie in protocollen van verschillende bedrijven; in feite mag niet worden vergeten dat de diagnostische prestaties van RPR grondig worden beïnvloed door de stadia van syfilis-infectie, die niet volledig wordt behandeld in onze studie. Op basis van onze bevindingen wordt de hoogste gevoeligheid (100%) beschouwd als een beperking van de ecotest-RPR serologische test aangezien de valse positiviteit enorm is als gevolg van kruisreactieve antilichamen. Ook de kans op het missen van syfilitische gevallen in verschillende stadia is er vanwege het prozone-effect., Deze hoge gevoeligheid van RPR heeft een negatieve implicatie in die verkeerd gediagnosticeerde individuen worden verondersteld om medicatie samen met hun seksuele partners (als er) te nemen; dit fenomeen resulteert in economische, drug resistentie, en sociale gevolgen in de gemeenschap. Bovendien zal bloed van donors die verkeerd zijn gediagnosticeerd en als positief worden bestempeld, worden weggegooid. Daarom, in aanwezigheid van deze beperking en met de beschikbaarheid van andere syfilis screening tests, het enige gebruik van ECOTEST-RPR assay routinematig als een diagnostische methode blijft van grote zorg in het studiegebied.,
niettemin vertoonde de specificiteit van de test in onze studie de laagste prestaties in vergelijking met het Indiase en Zuid-Afrikaanse rapport (96,96% en 100% resp.) en onvergelijkbaar zeer hoog met betrekking tot bevindingen uit Turkije en Letland (0%) . In tegenstelling tot bevindingen uit studies, die komen met een superieure specificiteit van RPR , en we vonden een lage specificiteit van handmatige ECOTEST-RPR testprestaties. De waarschijnlijke verklaring kan de variatie in het type methoden tussen onze studie en die van hen zijn., Hoewel RPR over het algemeen een niet-reponemale test is, gebruikten we een conventionele handmatige ECOTEST-RPR testmethode terwijl hun methode de geautomatiseerde RPR-test was, wat aangeeft dat de geautomatiseerde interpersoonlijke verschillen en andere confounders heeft verminderd. Bovendien beïnvloedt de klinische fase van de deelnemers aan het onderzoek (primaire, secundaire en tertiaire syfilis) de specificiteit van de test vanwege het prozonefenomeen., Aangezien de rapportage van het RPR-testresultaat (als positief of negatief) gebaseerd is op observatie, kunnen de subjectieve (interpersoonlijke) variatie en daaropvolgende beslissingen tussen laboratoriumanalisten bovendien de specificiteit van het testresultaat beïnvloeden.
na de innovatieve introductie van ELISA-en recombinant-DNA-technologie (rDNA) voor de diagnose van syfilis werd de traditionele tweestappenaanpak van een eerste screening met een niet-reponemale test en vervolgens met een Treponema-specifieke bevestigingstest geconfronteerd, en als gevolg daarvan verschenen twee diagnostische gedachten., De ene school promoot het gebruik van MEB als screeningtest die door een andere test (technologie of methode, maar met gelijke of hogere specificiteit) moest worden bevestigd, en de andere school stelt de traditionele aanpak van een algoritme voor .
Het aanvaarden van de traditionele of de andere aanpak, waarbij de prestaties van de ELISA moeten worden beoordeeld aan de hand van een betere methode, is verplicht. In tegenstelling tot de ECOTEST-RPR test, heeft DIALAB-ELISA een betere testprestatie met betrekking tot Randox-TPHA., In deze studie vonden we 5 vals-positieven met de DIALAB-ELISA test, wat een vals-positief Diagnostisch percentage van 8% oplevert; dit blijkt de minste waarde te zijn in vergelijking met die van RPR (31%).
de gevoeligheid en specificiteit van DIALAB-ELISA met betrekking tot Randox-TPHA zijn respectievelijk 98,4% en 94,9%. De bevindingen uit verschillende studies hebben een gevoeligheid en specificiteit van 90 tot 100% opgeleverd, verreweg een resultaat dat in lijn is met onze studie ., Ondanks deze overeenkomsten mag niet worden vergeten dat andere bevindingen over de prestaties van ELISA matig verschillen van de resultaten van de huidige studie. De meest waarschijnlijke reden voor deze prestatie variatie kan te wijten zijn aan het type immunodominant syfilis eiwitten die zijn opgenomen in de putten van ELISA kits.
tijdens de evaluatie van de vergelijkende voorspelling van een diagnostische kit met een referentiestandaard, zullen verschillende kwesties van invloed zijn op de interpretatie van de resultaten waarvan de prevalentie/omvang van een ziekte de belangrijkste factor is .,
in het huidige onderzoek zijn de positieve en negatieve voorspellende waarden van ECOTEST-RPR respectievelijk 76,2 en 100%. In de aanwezigheid van variabiliteit bij de deelnemers aan het onderzoek (rekening houdend met 50% van de deelnemers waren positief voor ECOTEST-RPR in deze studie), verschillende studies komen met voorspellende waarden van ECOTEST-RPR vergelijkbaar met die van de huidige studie, terwijl verschillende voorspellende waarden van ECOTEST-RPR zijn gemeld uit andere studies . De PPV en NPV van DIALAB-ELISA waren respectievelijk 92,3% en 98,9% in deze studie., Rapporten uit studies toonden eveneens PPV ’s en NPV’ s aan die vergelijkbaar zijn met de onze , terwijl variabele voorspellende waarden werden gezien uit een Turks onderzoek . Zoals we eerder hebben gezegd, waren de voorspellende waarden in deze studie (voor ECOTEST-RPR en DIALAB-ELISA) vergelijkbaar en variabel, terwijl ze werden vergeleken met PVs uit verschillende studies; een cruciaal punt is dat de prevalentie de PVs van elke test beïnvloedt., Dit houdt in dat dezelfde diagnostische test een andere voorspellende nauwkeurigheid zal hebben, afhankelijk van de klinische setting/aard van de deelnemers aan het onderzoek; we wijzen er dus sterk op dat de aanbevelingen in deze studie gebaseerd zijn op de 50% omvang van syfilis en dat andere studies de invloed van de prevalentie van de ziekte moeten erkennen bij het overwegen van voorspellende waarden van diagnostische of screeningstests.,
de gerapporteerde testprestaties van DIALAB-ELISA (gevoeligheid, specificiteit en voorspellende waarden) in deze studie zijn bemoedigend en maken de test een betere keuze van de diagnosebenadering in gevallen waarbij syfilis wordt vermoed. Bovendien was de overeenkomst tussen DIALAB-ELISA en TPHA bijna perfect (kappa-waarde 0,96) in vergelijking met die van ECOTEST-RPR en Randox-TPHA (kappa-waarde 0,88). Naast de superieure prestaties, heeft de ELISA techniek tal van voordelen ten opzichte van conventionele flocculatie screening tests (RPR)., De methode is ontworpen om mogelijk te worden geautomatiseerd plus de lezing van de resultaten wordt meestal uitgevoerd door een microtiterplaatlezer, waardoor de interpretatie van de resultaten objectief, in tegenstelling tot die van de RPR-test die subjectief is en dus vereist het hebben van uitgebreide ervaring. In tegenstelling tot RPR, zorgen zoals het ProZone fenomeen en het stadium van syfilis infectie hebben geen invloed op de ELISA methode. Ongeacht alle bovenstaande rationele voordelen, willen we de lezers niet te onderschatten de nadelen van ELISA methoden verlichten.
5., Conclusie
Deze studie levert een kenmerkende variabele diagnostische prestatie op van de DIALAB-ELISA-test en de momenteel beschikbare traditionele ECOTEST-RPR-test in Ethiopië in vergelijking met Randox-TPHA. ELISA kits met de recombinant T. pallidum antigenen hebben bepaalde aantrekkingskracht als diagnostisch hulpmiddel. We hebben echter gewaarschuwd voor de effectiviteit van de onafhankelijke toepassing van zowel ECOTEST-RPR als ELISA als screening/diagnostische test voor syfilis infectie., Daarnaast is het belangrijk te benadrukken dat zorgverleners de klinische en behandelingsgeschiedenis van elke patiënt grondig moeten beoordelen, terwijl zij het type test moeten kiezen en de resultaten van RPR-en ELISA IgG/IgM-tests voor syfilisdiagnose moeten interpreteren. Daarom moeten er grondige studies worden uitgevoerd met het oog op een wijziging van het huidige diagnosesysteem dat in de Gemeenschap wordt gebruikt.,tr>
beschikbaarheid van gegevens
De auteurs bevestigen dat alle gegevens die onze bevindingen ondersteunen, in het manuscript zijn opgenomen en zonder beperking volledig beschikbaar zijn.
ethische goedkeuring
ethische goedkeuring werd verkregen van de University Of Gondar Research Ethics Committee., Deelname was vrijwillig en er werd geïnformeerde toestemming verkregen van alle proefpersonen die accepteerden om deel te nemen aan het onderzoek. De bereidheid van de deelnemers werd mondeling gevraagd na kort uitleg te hebben gegeven over de doelstellingen van de studie, de risico’ s en voordelen van de procedures en het recht om niet in hun eigen taal aan de studie deel te nemen. De auteurs kregen mondeling geà nformeerde toestemming alvorens een van de deelnemers aan deze studie op te nemen., Schriftelijke toestemming werd niet verkregen omdat syfilis-positieve deelnemers werden gerekruteerd uit het poliklinieklaboratorium van het Gondar University Hospital waar ze werden gestuurd om een syfilis antilichaamtest te ondergaan. Op dezelfde manier werden 80 ogenschijnlijk gezonde deelnemers zonder voorgeschiedenis van seksueel overdraagbare aandoeningen gerekruteerd uit de bloedbank van het ziekenhuis; dus namen we in beide groepen geen extra monsters, maar gebruikten we eerder het reeds verstrekte bloedmonster dat ze in het ziekenhuislaboratorium en de bloedbank leveren., De aanvullende sociodemografische gegevensverzameling was een niet-invasieve procedure zonder risico. Daarom werd, gezien al deze feiten, alleen mondelinge overeenkomst verkregen om in de studie te worden opgenomen. Daarna werden alleen vrijwillige deelnemers die bereid zijn om ons een mondelinge toestemming te geven (akkoord te gaan om deel te nemen) in de studie gerekruteerd.
belangenconflicten
De auteurs verklaren geen concurrerende belangen te hebben met betrekking tot deze studie.,
Auteurs Bijdragen
Markos Negash en Demeke Geremew bedacht de studie concept en ontwierp de studie; Markos Negash en Tadelo Wondmagegn uitgevoerd met het verzamelen van gegevens en het laboratorium analyse; Demeke Geremew en Tadelo Wondmagegn toezicht op het verzamelen van gegevens en het laboratorium analyse; Markos Negash, Demeke Geremew, en Tadelo Wondmagegn de gegevens geanalyseerd en de voorbereiding van het eerste manuscript ontwerp; en Markos Negash en Demeke Geremew herzien van het ontwerp. Alle auteurs hebben het definitieve manuscript gelezen en goedgekeurd.,
Dankbetuigingen
De auteurs willen hun technisch assistent, de Heer Amare Kifle, bedanken voor zijn uitstekende technische ondersteuning tijdens de uitvoering van het onderzoek. De dank van de auteurs gaat ook uit naar alle deelnemers aan de studie en het Ziekenhuis van de Universiteit van Gondar. De auteurs zijn ook dankbaar voor de medewerkers van het Gondar Blood Bank Center voor hun onvoorwaardelijke steun tijdens de studie.
