• membrane microvesicles
• surowica
• osocze
• koagulacja
• toczeń

z dużym zainteresowaniem przeczytaliśmy artykuł Kato i współpracowników dotyczący „pęcherzyki membranowe pochodzące z apoptozy napędzają szlak CGAS-STING i zwiększają produkcję IFN typu i w toczniu układowym rumieniowaty”.,1 obawiamy się jednak, że autorzy badali wyłącznie surowicę krwi, czyli wszystkie próbki krwi od swoich pacjentów z toczniem i zdrowymi kontrolami były koagulowane ex vivo przed analizą.

podczas krzepnięcia w probówce mogą wystąpić co najmniej trzy główne zmiany w populacji mikrowęzłów membranowych (MVs). Po pierwsze, podzbiór krążących MVs uczestniczą w krzepnięciu i stają się konsumowane przez krzepnięcie., Na przykład, badania z naszej grupy i innych wykazały, że ponad połowa całkowitej membrany MVs w plazma2 krwi lub MVs3 4 generowane in vitro wykazują fosfatydyloseryny (PS) na ich powierzchni. PS-dodatnie MVs są prokoagulantami w stosunku do tych, które są ujemne PS2 3 5, ponieważ PS tworzy powierzchnię błony katalitycznej, która sprzyja powstawaniu i katalizie kompleksów czynników krzepnięcia.3 6 jest to szczególnie prawdziwe w przypadku apoptotycznych MVs, 3 5 7 8, ponieważ ekspozycja powierzchni membrany PS jest cechą charakterystyczną apoptozy komórkowej.,W ten sposób PS-dodatni MVs może być preferencyjnie zaangażowany w tworzenie skrzepu w probówce do pobierania próbek, gdy krew jest pobierana bez leków przeciwzakrzepowych. Pozostałe MVs w probówce surowicy mogą nie być reprezentatywne dla pierwotnej populacji MVs, które znajdowały się w obiegu.4

drugą zmianą w czasie krzepnięcia ex vivo jest pokolenie nowej populacji MVs, które nie były pierwotnie przedstawione w obiegu. Płytki krwi aktywują się podczas tworzenia skrzepu w probówce i uwalniają sztucznie wygenerowany MVs in vitro podczas procesu pobierania próbek.,10 MVs pochodzenia płytkowego generowane w probówce może stanowić 50% MVs w surowicy.Inne komórki krwi mogą również uwalniać MVs podczas krzepnięcia ex vivo. Te „sztuczne” MVs w surowicy nie mogą reprezentować stanu patofizjologicznego krwi krążącej u pacjentów z toczniem i zdrową grupą kontrolną.

trzecią zmianą podczas krzepnięcia jest możliwe rozszczepienie białek na MVs przez proteazy, czyli trombinę, powstałą podczas kaskady krzepnięcia. Problem ten nie był szeroko badany w dziedzinie badań SN, ale jest znany w innych dziedzinach., Na przykład trombina trawi apolipoproteinę-B na fragmenty, 11 i „nienaruszone” lipoproteiny są wyizolowane z osocza, a nie z surowicy.

naszym zdaniem plazma12 we krwi przygotowana w obecności antykoagulantów – powinna być stosowana w badaniach MV, ponieważ pozwala uniknąć spożycia „oryginalnego krążącego” MVs i produkcji „sztucznego” MVs, a także ekspozycji na proteazy podczas krzepnięcia ex vivo w probówkach surowicy. Ale wyniki badań z surowicy, jak stosowane przez Kato i wsp. i innych grup, powinny być potwierdzone z osocza krwi., Artefakty wywołane przez krzepnięcie krwi w probówce mogą w dużym stopniu wpływać na wyniki i wnioski z wszelkich badań membrany krążącej MVs w badaniach klinicznych translacyjnych. Dlatego pobieranie próbek krwi z membrany krążącej MVs u ludzi jest ważnym punktem, który musi zostać wyjaśniony wśród badaczy, którzy prowadzą kliniczne badania translacyjne.