Streszczenie

Tło. Kiła jest chorobą przenoszoną drogą płciową (STD) spowodowaną przez krętek Treponema pallidum i nadal stanowi poważny problem zdrowia publicznego w Afryce, w tym w Etiopii. Kiła diagnoza jest dokonywana przez albo nontreponemal lub treponemal podejścia, choć w krajach rozwijających się diagnoza opiera się głównie na niespecyficznych testów z kilku powodów., Tak więc, celem tego badania była ocena czułości, swoistości, wartości prognostycznych i zgody rapid plasma reagin (RPR) i enzymatycznego testu immunosorbent (ELISA) z Treponema pallidum testu hemaglutynacji (TPHA) jako złoty standard w diagnostyce kiły. Wyniki. Czułość, swoistość oraz pozytywne i negatywne wartości prognostyczne ECOTEST-RPR wynosiły odpowiednio 100%, 80,8%, 76,2% i 100%. Jednak czułość, swoistość oraz pozytywne i negatywne wartości predykcyjne DIALAB-ELISA wynosiły odpowiednio 98,4%, 94,9%, 92,3% i 98,9%., Porozumienie pomiędzy DIALAB-ELISA i Randox-Tpha było doskonałe (wartość kappa: 0,96) w porównaniu do testu ECOTEST-RPR i Randox-Tpha (wartość kappa: 0,88). Wniosek. W badaniu stwierdzono charakterystycznie zmienną wydajność testu DIALAB-ELISA oraz obecnie dostępnego tradycyjnego testu ECOTEST-RPR. Zastosowanie ECOTEST-RPR jako testu diagnostycznego jest skonfrontowane z jego fałszywie dodatnim wynikiem. Tak więc ani ECOTEST-RPR, ani DIALAB-ELISA nie mogą być stosowane jako test przesiewowy lub potwierdzający w diagnostyce kiły., W związku z tym należy przeprowadzić szczegółowe badania mające na celu zmianę obecnego systemu diagnostycznego we Wspólnocie.

1. Tło

kiła jest chorobą przenoszoną drogą płciową (STD) spowodowaną przez krętek Treponema pallidum (T. pallidum), które mogą być rozprzestrzeniane przez kontakt seksualny, przez transfuzję krwi i poprzez transmisję pionową . Kiła dotyka 12 milionów ludzi rocznie i powoduje znaczną zachorowalność, jeśli nie śmiertelność. W Afryce Subsaharyjskiej kiła pozostaje poważnym problemem zdrowia publicznego. Rozpowszechnienie aktywnego zakażenia kiłą wśród krajów Afrykańskich wykazało 12.,8% w Tanzanii i Kenii . Jednak wielkość kiły wśród dawców krwi w Gondarze (Etiopia) wynosiła 1,3% w 2010 roku .

diagnoza kiły może być dokonana za pomocą kilku podejść. Oprócz podstawowej metody diagnostyki serologicznej inną metodą jest mikroskopia ciemnego pola, w której krętek jest badany i obserwowany z zmiany pod mikroskopem ciemnego pola . T., pallidum, czynnik etiologiczny kiły, produkuje co najmniej dwa typy przeciwciał w infekcjach ludzkich: przeciwciała treponemalne, które mogą być wykryte przez fluorescencyjne wchłanianie przeciwciał treponemalnych (FTA-ABS) i przeciwciało nontreponemalne (reagin), które mogą być wykryte przez kartę antygenu RPR lub test VDRL. Testy nontreponemalne, takie jak venereal disease research laboratory (VDRL) i rapid plasma reagin (RPR), opierają się na reakcji kardiolipiny z niespecyficznymi przeciwciałami wytwarzanymi w odpowiedzi na zakażenie syfilityczne ., Jednak test ten nie ma czułości i swoistości z kilku powodów, w tym ciąży, chorób autoimmunologicznych, infekcji i etapów infekcji kiły . W związku z tym, treponemalne specyficzne testy, takie jak enzymatyczny test immunologiczny (EIA), T. pallidum hemaglutynacji test (tpha), mikrohemaglutynacji, fluorescencyjny test absorpcji przeciwciał treponemalnych (FTA-abs) i enzymatyczny test immunosorbent (ELISA), które wykrywają przeciwciała IgG przeciw antygenowym składnikom T. pallidum są stosowane przede wszystkim w celu potwierdzenia rozpoznania kiły u pacjentów z reaktywnym testem nontreponemal ., Pomimo dostępności stosunkowo czułych testów i przystępnego leczenia, choroba pozostaje globalnym problemem zdrowotnym .

kiła pozostaje główną przyczyną chorobowości reprodukcyjnej i słabych wyników ciąży w krajach rozwijających się, w tym w Etiopii. U 80% zakażonych kobiet w ciąży prowadzi to do poronień martwych i samoistnych (40%), zgonów okołoporodowych (20%) oraz poważnych infekcji noworodków i dzieci o niskiej masie urodzeniowej (20%). Kiła nabrała również nowych możliwości zachorowalności i śmiertelności dzięki powiązaniu ze zwiększonym ryzykiem zakażenia HIV .,

badanie przesiewowe kobiet w ciąży, dawców krwi i pracowników socjalnych (kierowców i nowo zatrudnionych pracowników socjalnych) na kiłę jest rutynową czynnością we wszystkich placówkach opieki zdrowotnej w Etiopii. W tym celu, ze względu na efektywność kosztową, RPR, który ma wątpliwą wydajność testu, jest zwykle używany jako narzędzie przesiewowe w Etiopii. Jednak pomimo doniesień o wynikach diagnostycznych dostarczonych przez producentów, dane dotyczące wyników badań RPR w badanym obszarze pozostają ograniczone., Celem tego badania była ocena czułości, swoistości, wartości prognostycznych i zgodności ECOTEST-RPR i DIALAB-ELISA z testem Randox-TPHA jako złotego standardu diagnostyki kiły wśród pacjentów podejrzewanych o kiłę uczęszczających do szpitala University of Gondar (UGH), Północno-Zachodnia Etiopia.

2. Metody

2.1. Projekt badania, okres i obszar

, Uniwersytet Gondar Hospital jest jednym z pionierskich szpitali dydaktycznych w Etiopii, znajduje się w regionie Amhara, w północno-zachodniej Etiopii. Szpital posiada osiem różnych sekcji laboratoryjnych, w tym serologii, która zapewnia nauczanie, diagnostyka i badania dla społeczności uniwersyteckiej, mieszkańców Gondar town, i pobliskich populacji Woreda.

2.2. Uczestnicy badania

Po uzyskaniu świadomej zgody w badaniu wzięło udział łącznie 160 uczestników., Spośród nich 80 uczestników zdiagnozowano jako pozytywne zakażenie kiłą za pomocą rutynowo stosowanej techniki w obszarze badawczym (ECOTEST-RPR) w University of Gondar Teaching hospital Laboratory. Wykresy wszystkich pacjentów zostały zweryfikowane w celu oceny, czy rozpoczęto konkretne leczenie. Podobnie, 80 pozornie zdrowe osoby, które nie mają żadnej historii chorób przenoszonych drogą płciową zostały zrekrutowane z Gondar Blood Bank Center.

2.3., Próbki pobierano i przetwarzano

próbki krwi pobierano od każdego uczestnika i odwirowywano do momentu oddzielenia surowicy, a surowice przechowywano w temperaturze -20°C do czasu przeprowadzenia rzeczywistych badań laboratoryjnych. Przed uruchomieniem RPR, ELISA i TPHA przechowywane próbki surowicy rozmrażano w temperaturze 37°C w łaźni wodnej, aż powstały lód całkowicie się rozpuści. Następnie wykonano RPR, ELISA i TPHA, a wyniki uzyskano zgodnie z instrukcjami producenta zestawu. Próbka, która wykazuje dwuznaczny wynik dla któregokolwiek z testów została ponownie przetestowana., Badanie to zostało przeprowadzone zgodnie ze standards for Reporting Diagnostic Accuracy Studies (STARD) essential items for reporting diagnostic accuracy studies (http://www.equator-network.org/reporting-guidelines/stard).

2.3.1. ECOTEST-RPR

antygen użyty w zestawie ECOTEST-RPR (Assure Tech, Hangzhou, Chiny) jest modyfikacją antygenu VDRL, który zawiera mikrocząsteczkowy węgiel drzewny w celu zwiększenia wizualnej różnicy między wynikiem pozytywnym i negatywnym., Surowica pacjenta zmieszana z antygenem cardiolipin drobnocząsteczkowym, który został wzmocniony cholesterolem, lecytyną i węglem drzewnym spowoduje makroskopowo widoczne wytrącanie typu flokulacji, jeśli surowica pacjenta zawiera reagin-przeciwciało utworzone przeciwko cardiolipin (szczegółowa procedura może być dostępna z instrukcji producenta, Assure Tech, Hangzhou, Chiny.,) Interpretację dla każdego badania przeprowadzono za pomocą kontroli (dodatnich i ujemnych) zgodnie z instrukcją producenta jako reaktywne (R), jeśli widoczne jest zbrylanie, lub niereaktywne (NR)—gładka zawiesina, brak zbrylania lub niewielka chropowatość.

2.3.2. DIALAB kiła IgG/IgM ELISA

za pomocą metody antygen Sandwich enzymatycznego (ELISA), ten kiła IgG/IgM test ELISA (DIALAB, Niemcy) może wykryć przeciwciała anty-TP. Polistyrenowe paski microwell są wstępnie pokryte rekombinowanymi antygenami Treponema pallidum wytwarzanymi w E. coli., Rekombinowane antygeny TP sprzężone z peroksydazą chrzanową (HRP) są inkubowane w mikrofalach z próbką. Precoated antygeny wskazują te same epitopy jak HRP-koniugate antygeny, ale gospodarze są różne. Jeśli anty-TP jest obecny w próbce podczas inkubacji, skoniugowane i wstępnie powleczone antygeny będą wiązane z domenami przeciwciała o dwóch zmiennych, a to, co jest wychwytywane w fazie stałej, to swoisty immunokompleks przeciwciało-antygen., Ważne jest, aby roztwory chromogenu zawierające tetrametylobenzydynę (TMB) i nadtlenek mocznika były dodawane do studzienek po fazie mycia w celu usunięcia próbki i niezwiązanych koniugatów. Chromogeny bezbarwne są hydrolizowane przez sprzężoną koniugację HRP do produktu o niebieskim kolorze, gdy obecny jest kompleks sandwich antygen-przeciwciało-antygen. W tym momencie niebieski kolor zmienia kolor na żółty. Dzieje się tak po zatrzymaniu reakcji z kwasem siarkowym. Co może być mierzona proporcjonalnie w tym momencie jest ilość przeciwciał w próbce z ilością koloru., Bezbarwne studnie wskazują ujemne próbki anty-TP (szczegółowa procedura jest dostępna z instrukcji producenta, DIALAB, Niemcy.)

(1) interpretacja wyników. Każdą mikropłytkę należy rozpatrywać oddzielnie przy obliczaniu i interpretacji wyników testu, niezależnie od liczby płytek jednocześnie przetwarzanych. Wyniki są obliczane przez odniesienie wartości gęstości optycznej (OD) każdej próbki do wartości odcięcia (CO) płyty., Jeżeli odczyt odcięcia opiera się na czytniku płyt z pojedynczym filtrem, wyniki należy obliczyć poprzez odjęcie wartości pustej studni OD wartości raportu drukowania próbek i kontroli. Jeśli odczyt jest oparty na czytniku płyt z podwójnym filtrem, nie odejmuj pustej studni OD wartości raportu wydruku próbek i elementów sterujących.

2.3.3. Randox tpha

tpha (Randox Laboratories, UK) odczynniki są używane do wykrywania ludzkich przeciwciał przeciwko T. pallidum za pomocą pośredniej metody hemaglutynacji (IHA)., Zachowane erytrocyty ptaków pokryte są antygenowymi składnikami patogennego T. pallidum (szczep Nicholsa). Komórki te aglutynują się w obecności swoistych przeciwciał przeciwko T. pallidum i wykazują charakterystyczne wzory w płytkach mikrotitracyjnych. Wszelkie niespecyficzne reakcje zachodzące są wykrywane za pomocą komórek kontrolnych, które są ptasimi erytrocytami, nie pokrytymi antygenami T. pallidum. Niespecyficzne reakcje mogą być również absorbowane za pomocą tych komórek kontrolnych. Przeciwciała przeciwko nieopatogennym treponemom są wchłaniane przez ekstrakt z treponemów Reitera, zawarty w zawiesinie komórkowej., Wyniki badań są uzyskiwane w ciągu 45-60 minut, a wzorce aglutynacji komórkowej są zarówno łatwe do odczytania, jak i długotrwałe. (Szczegółowa procedura jest dostępna z instrukcji producenta, Randox Laboratories, Wielka Brytania.)

(1) interpretacja wyników. Gdy studnia testowa jest dodatnia, należy obserwować studnię kontrolną. Komórki kontrolne powinny osiąść na przycisku kompaktowym. Nie należy ich używać jako porównania dla niereaktywnych wzorców surowicy, ponieważ komórki kontrolne dadzą bardziej zwarty wzór niż komórki testowe., Aglutynacja w studni kontrolnej wskazuje na obecność niespecyficznych aglutynin w próbce; badanie należy zgłosić jako nieprawidłowe. Serum, które daje ten wynik, może być wchłaniane za pomocą komórek kontrolnych, jak szczegółowo opisano w ramach niespecyficznego wchłaniania. Wątpliwą reakcję z komórkami badanymi należy zgłaszać jako nieokreśloną.

2.4. Analiza statystyczna

dane zostały wyczyszczone i dwukrotnie wprowadzone do arkusza kalkulacyjnego Excel i przetransportowane do wersji SPSS 20., Oprogramowanie do dwukierunkowej analizy tabeli awaryjnej JavaStat (http://statpages.org/ctab2x2.html) było również używane do obliczania czułości, swoistości oraz wartości predykcyjnych i kappa. Wyniki badań ECOTEST-RPR i DIALAB-ELISA porównano z wynikami metody referencyjnej (Randox-Tpha). Wartość kappa została ustalona w celu oceny porozumienia między ECOTEST-RPR, DIALAB-ELISA i Randox-Tpha.

3. Wyniki

w badaniu wzięło udział łącznie 160 uczestników. 80 (50%) z nich zdiagnozowano kiłę przy użyciu RPR jako testu diagnostycznego w badanym obszarze., Jednak 80 (50%) z nich było najwyraźniej zdrowymi uczestnikami i było ujemnych na kiłę we wszystkich rodzajach testów (ECOTEST-RPR, DIALAB-ELISA i Randox-Tpha). Przedział wiekowy uczestników wynosił od 20 do 52 lat, a większość z nich (77%) wynosiła od 22 do 32 lat. Wśród uczestników 84 (52,5%) stanowili mężczyźni, a 76 (47,5%) kobiety. Większość badanych (107, 66,9%) pochodziło z obszarów wiejskich okolicznych mieszkańców, a 53 (33,1%) stanowili mieszkańcy miast (Tabela 1)., Wśród 40 pacjentów, u których zdiagnozowano kiłę w teście RPR, 2 pacjentów miało kiłę pierwotną, a 9 pacjentów miało kiłę wtórną z kliniczną prezentacją nieitchy wysypki plamkowo-grudkowej, kłykciny kończystej i uogólnionej limfadenopatii, podczas gdy dane kliniczne pozostałych pacjentów RPR-dodatnich nie były w pełni udokumentowane na wykresach medycznych.

czułość, swoistość i wartości predykcyjne ECOTEST-RPR i DIALAB-ELISA w tym badaniu oceniano przy użyciu Randox-TPHA jako złotego standardu w diagnostyce kiły., Tak więc czułość i swoistość ECOTEST-RPR do wykrywania kiły wynosiły odpowiednio 100 i 80,8%. Dodatnia wartość predykcyjna (PPV) i ujemna wartość predykcyjna (NPV) wynosiły odpowiednio 76,2 i 100%. Umowa między Randox-TPHA i ECOTEST-RPR tests była dobra z wartością kappa wynoszącą 0,88 (Tabela 2).

ponadto czułość i swoistość DIALAB-ELISA w wykrywaniu kiły wynosiły odpowiednio 98,4 i 94,9%. Dodatnia wartość predykcyjna (PPV) i ujemna wartość predykcyjna (NPV) wynosiły odpowiednio 92,3 i 98,9%., Zgodność między testami TPHA i ELISA była prawie doskonała, a wartość kappa wynosiła 0,96 (Tabela 3).

w tym badaniu dokonaliśmy przeglądu Wykresów medycznych każdego uczestnika i stwierdziliśmy, że wszyscy pacjenci ECOTEST-RPR-dodatni otrzymali odpowiednie leki. Ponadto, znaleźliśmy dwie próbki z niejednoznacznymi wynikami badań DIALAB-ELISA, ale reanaliza tych próbek DIALAB-ELISA i Randox-Tpha daje pozytywny wynik w obu testach. Podobnie, zgłosiliśmy 15 rozbieżnych wyników (tj.,, ECOTEST-RPR-dodatni, ale DIALAB-ELISA-ujemny) jako wynik ujemny po reanalizie i zweryfikowany jako ujemny przez Randox-TPHA.

4. Dyskusja

zakażenie kiłą można zdiagnozować za pomocą podejścia treponemalnego lub niereponemalnego. Nucleic acid Amplification techniques (NAAT) jak polymerase chain reaction (PCR)otworzyli drogę dla rozwoju wysoce wrażliwych i specyficznych point-of-care testów., Niemniej jednak stosowanie metod NAAT w krajach rozwijających się jest ograniczone ze względu na ich przystępność i koszty oraz złożoność technik, które mają być stosowane przez istniejące zasoby ludzkie w obszarach diagnostycznych. Dodatkowo udostępniono ostateczny test diagnostyczny syfilityczny oparty na wykrywaniu IgG specyficznego dla treponemy. Jednak technika nontreponemal jak RPR jest najczęściej stosowany w tym obszarze badania, choć jest zawodny jako pozytywny wynik nie musi wskazywać infekcji treponemal., Tak więc jego zastosowanie w badaniach przesiewowych dawców krwi, kobiet w ciąży i pracowników socjalnych zostało zakwestionowane. W związku z tym oceniliśmy skuteczność testu ECOTEST-RPR i DIALAB-ELISA z Randox-TPHA jako wzorcowego testu diagnostycznego na kiłę.

w obecnym badaniu ogólna czułość i swoistość ECOTEST-RPR w porównaniu z Randox-TPHA wynosiły odpowiednio 100% i 80,8%. W naszym badaniu czułość i swoistość RPR były porównywalne z wynikami z Portugalii, Korei i Nepalu ., Jednak sama wrażliwość była znacznie wyższa w porównaniu z raportami z kilku badań . Najwyższa (100%) czułość w naszym stwierdzeniu może być następująca: po pierwsze, nasi uczestnicy mogą mieć nie tylko zakażenie kiłą, co sugeruje reaktywność krzyżową ECOTEST – RPR z antygenami cholesterolu, lecytyny i kardiolipiny występującymi w innych procesach chorobowych w wyniku niszczenia komórek., Po drugie, może to być spowodowane zmiennością protokołów z różnych firm, jak również; w rzeczywistości, nie należy zapominać, że wydajność diagnostyczna RPR jest głęboko wpływa na etapy zakażenia kiłą, który nie jest w pełni rozwiązany w naszym badaniu. W oparciu o nasze ustalenia, najwyższa Czułość (100%) jest uważana za ograniczenie testu serologicznego ECOTEST-RPR, ponieważ jego fałszywie dodatni wynik jest ogromny ze względu na krzyżowo reaktywne przeciwciała. Ponadto, szansa na brak przypadków syfilitycznych na różnych etapach jest tam ze względu na efekt prozone., Ta wysoka wrażliwość RPR ma negatywny wpływ na to, że błędnie zdiagnozowane osoby powinny przyjmować leki razem ze swoimi partnerami seksualnymi (jeśli tam są); zjawisko to powoduje ekonomiczne, lekooporność i skutki społeczne w społeczności. Poza tym krew od dawców, które są nieprawidłowo zdiagnozowane i oznaczone jako pozytywne, zostanie odrzucona. W związku z tym, w obecności tego ograniczenia i przy dostępności innych badań przesiewowych kiły, jedyne wykorzystanie testu ECOTEST-RPR rutynowo jako metody diagnostycznej pozostaje wielkim problemem w obszarze badania.,

jednak specyfika testu w naszym badaniu wykazała najniższe wyniki w porównaniu z raportem Indyjskim i południowoafrykańskim (96,96% i 100%, resp.) i nieporównywalnie bardzo wysokie w odniesieniu do ustaleń z Turcji i Łotwy (0%) . W przeciwieństwie do wyników badań, te pochodzą z najwyższej specyficzności RPR, a my stwierdziliśmy niską specyficzność ręcznego testu ECOTEST-RPR. Prawdopodobnym wyjaśnieniem może być różnica w rodzaju metod między naszymi badaniami a ich., Chociaż RPR jest zwykle testem niereponemalnym, użyliśmy konwencjonalnej ręcznej metody testu ECOTEST-RPR, podczas gdy ich metodą był zautomatyzowany test RPR, wskazując, że zautomatyzowany zmniejszył różnice interpersonalne i inne czynniki zakłócające. Ponadto stopień kliniczny uczestników badania (kiła pierwotna, wtórna i trzeciorzędowa) wpływa na specyfikę badania ze względu na zjawisko prozone., Ponadto, ponieważ raportowanie wyniku testu RPR (jako pozytywnego lub negatywnego) opiera się na obserwacji, subiektywna (interpersonalna) zmienność i późniejsze decyzje pomiędzy analitykami laboratoryjnymi potencjalnie wpływają na specyfikę wyniku testu.

Po innowacyjnym wprowadzeniu technologii ELISA i rekombinowanego DNA (rDNA) w diagnostyce kiły, skonfrontowano tradycyjne dwuetapowe podejście do pierwszego badania przesiewowego z użyciem testu nietreponemalnego, a następnie z użyciem testu potwierdzającego specyficznego dla treponemy i w rezultacie pojawiły się dwie myśli diagnostyczne., Jedna szkoła promuje stosowanie EIA jako testu przesiewowego, który musiał zostać potwierdzony innym testem (Technologia lub metoda, ale o równej lub wyższej specyficzności), a druga szkoła proponuje tradycyjne podejście do algorytmu .

akceptując tradycyjne lub inne podejście, ocena skuteczności ELISA w odniesieniu do lepszej metody jest obowiązkowa. W przeciwieństwie do testu ECOTEST-RPR, DIALAB-ELISA ma lepszą wydajność testu w odniesieniu do Randox-TPHA., W tym badaniu, znaleźliśmy 5 fałszywie dodatnich wyników w teście DIALAB-ELISA, co daje fałszywie dodatni wskaźnik diagnostyczny wynoszący 8%; wydaje się, że jest to najmniejsza wartość w porównaniu do RPR (31%).

czułość i swoistość DIALAB-ELISA w odniesieniu do Randox-Tpha wynoszą odpowiednio 98,4% i 94,9%. Wyniki uzyskane z kilku badań wykazały czułość i swoistość w zakresie od 90 do 100%, co jest zdecydowanie zgodne z naszym badaniem ., Pomimo tych podobieństw nie należy zapominać, że inne ustalenia dotyczące skuteczności testu ELISA w umiarkowany sposób różnią się od wyników obecnego badania. Najbardziej prawdopodobnym powodem tej zmiany wydajności może być ze względu na rodzaj immunodominant kiła białek, które są włączone do studni zestawów ELISA.

podczas oceny porównawczej predykcji zestawu diagnostycznego ze standardem referencyjnym na interpretację ich wyników będzie miało wpływ kilka kwestii, których częstość występowania/wielkość choroby jest najważniejszym czynnikiem .,

w obecnym badaniu pozytywne i negatywne wartości prognostyczne ECOTEST-RPR wynoszą odpowiednio 76,2 i 100%. W obecności zmienności u uczestników badania (biorąc pod uwagę, że 50% uczestników było dodatnich dla ECOTEST-RPR w tym badaniu), kilka badań wykazało wartości predykcyjne ECOTEST-RPR podobne do tych z obecnego badania, podczas gdy różne wartości predykcyjne ECOTEST-RPR zostały zgłoszone z innych badań . W tym badaniu PPV i NPV DIALAB-ELISA wynosiły odpowiednio 92,3% i 98,9%., Podobnie, raporty z badań wykazały PPV i NPV, które są porównywalne z naszymi, podczas gdy zmienne wartości prognostyczne zostały zaobserwowane w tureckim badaniu . Jak już wcześniej stwierdziliśmy, wartości predykcyjne w tym badaniu (dla ECOTEST-RPR i DIALAB-ELISA) były porównywalne i zmienne w porównaniu z PVs z kilku badań; kluczową kwestią jest to, że częstość występowania wpływa na PVs dowolnego testu., Oznacza to, że ten sam test diagnostyczny będzie miał inną dokładność predykcyjną zgodnie z klinicznym ustawieniem / charakterem uczestników badania; w związku z tym zdecydowanie podkreślamy, że zalecenia zawarte w tym badaniu opierają się na 50% wielkości kiły i że inne badania powinny rozpoznać wpływ rozpowszechnienia choroby, rozważając wartości predykcyjne testów diagnostycznych lub przesiewowych.,

raportowana wydajność testu DIALAB-ELISA (czułość, swoistość i wartości predykcyjne) w tym badaniu jest zachęcająca i sprawia, że test jest lepszym wyborem podejścia diagnostycznego w przypadkach podejrzenia kiły. Ponadto porozumienie między DIALAB-ELISA i TPHA było prawie doskonałe (wartość kappa 0,96) w porównaniu z ECOTEST-RPR i Randox-Tpha (wartość kappa 0,88). Oprócz doskonałej wydajności, technika ELISA ma wiele zalet w stosunku do konwencjonalnych badań flokulacyjnych (RPR)., Metoda jest zaprojektowana potencjalnie do zautomatyzowania, a odczyt wyników jest zwykle przeprowadzany przez czytnik płyt mikrotiterowych, dzięki czemu interpretacja wyników jest obiektywna, w przeciwieństwie do testu RPR, który jest subiektywny i dlatego wymaga dużego doświadczenia. W przeciwieństwie do RPR, obawy takie jak zjawisko prozone i stadium zakażenia kiłą nie wpływają na metodę ELISA. Niezależnie od wszystkich powyższych racjonalnych korzyści, chcemy oświecić czytelników, aby nie lekceważyli wad metod ELISA.

5., Wnioski

w badaniu tym przedstawiono charakterystycznie zmienną wydajność diagnostyczną testu DIALAB-ELISA oraz obecnie dostępnego tradycyjnego testu ECOTEST-RPR w Etiopii w porównaniu z Randox-TPHA. Zestawy ELISA z rekombinowanymi antygenami T. pallidum mają pewne atrybuty jako narzędzie diagnostyczne. Ostrzegaliśmy jednak o skuteczności niezależnego stosowania zarówno ECOTEST-RPR, jak i ELISA jako testu przesiewowego/diagnostycznego w kierunku zakażenia kiłą., Ponadto należy podkreślić, że pracownicy służby zdrowia muszą dokonać dokładnego przeglądu historii klinicznej i leczenia każdego pacjenta przy wyborze rodzaju testu i interpretacji wyników testów RPR i ELISA IgG/IgM w diagnostyce kiły. W związku z tym należy przeprowadzić szczegółowe badania mające na celu zmianę obecnego schematu diagnostycznego stosowanego we Wspólnocie.,tr>

IRB: Institutional Review Board NPV: Negative predictive value NAAT: Nucleic acid amplification techniques PCR: Polymerase chain reaction PPV: Positive predictive value RPR: Rapid plasma reagin rDNA: Recombinant DNA STARD: Standards for Reporting Diagnostic Accuracy Studies STD: Sexually transmitted disease TPHA: T., hemaglutynacja pallidum t pallidum: Treponema pallidum UGH: University of Gondar Hospital VDRL: Venereal disease research laboratory.

dostępność danych

autorzy potwierdzają, że wszystkie dane wspierające nasze ustalenia są zawarte w manuskrypcie i są w pełni dostępne bez ograniczeń.

etyczne zatwierdzenie

etyczne Zezwolenie uzyskano od komitetu etyki badań Uniwersytetu Gondar., Udział był dobrowolny, a świadomą zgodę uzyskano od wszystkich uczestników, którzy wyrazili zgodę na udział w badaniu. Chęć uczestników została zapytana ustnie po krótkim wyjaśnieniu celów badania, zagrożeń i korzyści wynikających z procedur oraz prawa do nieuczestniczenia w badaniu przy użyciu ich lokalnego języka. Autorzy otrzymali ustnie świadomą zgodę przed włączeniem któregokolwiek z uczestników tego badania., Pisemna zgoda nie została uzyskana, ponieważ uczestnicy z dodatnim wynikiem kiły zostali zwerbowani z ambulatoryjnego laboratorium oddziału szpitala uniwersyteckiego Gondar, gdzie zostali wysłani do poddania się testowi przeciwciał kiły. Podobnie, 80 pozornie zdrowych uczestników bez chorób przenoszonych drogą płciową zostało zrekrutowanych ze szpitalnego banku krwi; tak więc w obu grupach nie pobraliśmy żadnych dodatkowych próbek, ale raczej wykorzystaliśmy już dostarczoną próbkę krwi, którą dostarczają w szpitalnym laboratorium i banku krwi., Dodatkowe gromadzenie danych socjodemograficznych było nieinwazyjną procedurą bez związanego z nią ryzyka. W związku z tym, biorąc pod uwagę wszystkie te fakty, uzyskano jedynie ustną zgodę na włączenie do badania. Następnie do badania rekrutowano tylko dobrowolnych uczestników, którzy są gotowi udzielić nam ustnej zgody (wyrażają zgodę na udział).

konflikty interesów

autorzy oświadczają, że nie mają konkurencyjnego interesu w odniesieniu do niniejszego opracowania.,

wkład autorów

Markos Negash i Demeke Geremew opracowali koncepcję badania i zaprojektowali badanie; Markos Negash i Tadelo Wondmagegn przeprowadzili zbieranie danych i analizę laboratoryjną; Demeke Geremew i Tadelo Wondmagegn nadzorowali zbieranie danych i analizę laboratoryjną; Markos Negash, Demeke Geremew i Tadelo Wondmagegn przeanalizowali dane i przygotowali pierwszy szkic rękopisu; Markos Negash i Demeke geremew zrewidował projekt. Wszyscy autorzy przeczytali i zatwierdzili ostateczny manuskrypt.,

podziękowania

autorzy pragną podziękować swojemu asystentowi technicznemu, Panu Amare Kifle, za jego doskonałe wsparcie techniczne podczas prowadzenia badań. Podziękowania autorów kierujemy również do wszystkich uczestników badania i Szpitala Uniwersyteckiego w Gondarze. Autorzy są również wdzięczni pracownikom Gondar Blood Bank Center za ich nieograniczone wsparcie podczas badania.