Avainsanat

Papanicolaou tahroja, Trichomonas vaginalis, mikroskopia

Johdanto

Trichomonas vaginalis on flagellated alkueläin, joka aiheuttaa Trichomonaisis ja on mostcommon parannettavissa sukupuolitauti maailmassa . Ihmispapillomaviruksen lisäksi trichomoniasis on yleisin sukupuolitauti UnitedStates tänään. Sekä naisten että miesten keskuudessa T., vaginalis, jolla on humanimmunodeficiency acquisition and transmission, on osoitettu useissa tutkimuksissa . Inwomen, trichomoniasis voi pelata rooli kehityksen kohdunkaulan neoplasia, leikkauksen jälkeisiä infektioita, ja haitallisia raskauden tuloksia ja tekijä epätyypillinen lantion inflammatorydisease ja hedelmättömyyttä. Miehillä trichomoniasis on syntynyt syy nongonoccalurethriitti ja edistää miesten tekijä hedelmättömyyttä . Yleisin diagnosointimenetelmä on yöpymisviljely, jonka herkkyysalue on 75-95% ., Menetelmiä, kuten asrapid antigeenin testaus ja transkriptio välittyvät vahvistus, on myös käytetty ja käski on suurempi herkkyys, mutta ne eivät ole laajassa käytössä . T. vaginalis-bakteerin esiintyminen voidaan todeta myös PCR: llä käyttäen genbank/L23861: lle ominaisia primereitä . Papa preparaatti on rutiininomainen seulontatesti, jota käytetään kohdunkaulan poikkeavuuksien ja kohdun kohdunkaulan prekanserousdysplastisten muutosten havaitsemiseen . Se havaitsee myös tiettyjä virus -, bakteeri-ja fungalinfektion kohdunkaula ja emätin ., Siellä on myös epidemiologisia ja kokeellisia että Papa-kokeilla on hyödyllistä havaita infektioita, jotka ovat riskitekijöitä, jotka liittyvät cervicalcancer, kuten ihmisen papilloomavirus . Tämän tutkimuksen tarkoituksena oli selvittää Papa-kokeen sopivuus kohdunkaulan ja emättimen näytteiden Trichomonas vaginalis-bakteerin havaitsemisessa.,

Materiaalit ja Menetelmät

Kolme sata kohdunkaulan ja emättimen näytteitä pumpulia kallistuu applikaattorit, jotka olivat sentfor mikroskopia olivat samanaikaisesti tutkittiin tavanomaisen menetelmä Papanicolaou -, kulttuuri-ja PCR läsnäolo Trichomonas vaginalis joissakin sairaaloissa Etelä-andWestern Nigeriassa.

Papanicolaou-menetelmällä

Jokainen näyte levitettiin puhdas rasva ilmainen liu ’ uta ja kiinteä ethernet-alkoholin 30min., Näytteet olivat värjätään, jonka Papanicolaou-menetelmällä seuraavasti: Harris’shaematoxylin ilman etikkahappoa 5 minuuttia, huuhdellaan juoksevalla vedellä ja eriytetty 1% acidalcoholfor 30 sekuntia ja blued Scottin vettä 2 minuuttia. Smears otettiin 95% alkoholia ja värjättiin OG6 2 minuuttia, huuhdeltiin 95% alkoholia ja värjättiin EA 35 2minuuttia. Smears sitten otettiin kaksi muutosta absoluuttista alkoholia, ksyleeni ja asennettu inDPX., Värjätään tahroja tutkittiin alla valo mikroskoopilla alhaisissa ja korkeissa powerobjectives läsnäolo Trichomonas vaginalis ja perinuclear halo.

märkävalmisteen tutkiminen

jokainen puuvillavillakärkinen annostelulaite huuhdeltiin tämän jälkeen koeputkessa, joka sisälsi noin 2 mlnormaalia suolaliuosta. Sisältö kaadettiin puhdas lasi liukumäki ja tutkitaan lightmicroscope läsnäolo nopeasti liikkuvia organismeja.

Kulttuuri T. vaginalis

Valmistelu kulttuuri keskipitkällä ja kulttuuri

Kupferberg Trichomonas keskipitkän oli valmistettu liuottamalla 23.,5g ja KupferbergTrichomonas pohja (QUELAB, Kanada) vuonna 950 ml tislattua vettä tuella lämpöä,steriloitu autoklaavissa 15 min 15 Ib paine (121°C) ja jäähdytetään. 50 ml heatinaktivoitua (55-60°C) naudan seerumia lisättiin. Antibiootteja (G-penisilliini ja streptomysiini) andantifungal (Amfoterisiini B) lisättiin seokseen ja sitä säilytetään 4ºC. Noin 15 ml themediumia laitettiin viljelyputkeen ja kuumennettiin 37°C: seen 15 min. Kohdunkaulan ja emättimen swabswere sijoitetaan keskipitkän ja inkuboidaan 37 ° C. 7 päivää, jonka jälkeen ne tutkittiin mikroskooppisesti., Väliaine pestiin kaksi kertaa steriilissä fosfaattipuskuroidussa suolaliuoksessa (PBS)pH7.2 ja sille tehtiin DNA-uutto.

DNA: n uutto, alukkeet ja PCR –

kulttuurien pestiin kahdesti steriiliä fosfaattipuskuroitua suolaliuosta pH7.2 ja keskeytetty in400µl T/E-puskuri. DNA-uutto suoritettiin käyttämällä SDS: ää ja proteinaasi K seurasi byctab/NaCl: ää. DNA: n esiintyminen varmistettiin elektroforeesilla ennen Pcramplifikaatiota. T: hen perustuvat primerit., vaginalis DNA: ta käytettiin monistamaan 300 bp pala ofgenome (TIB MOLBIOL, Saksa), kun taas PCR-reaktio suoritettiin käyttäen automatedthermal cycler (Eppendorf master lämpötilan gradientti).

Tulokset

Taulukko 1 Pap-preparaatti, märkä valmistelu-ja PCR –

300 näytteet tutkitaan Papa-tekniikka, 24 (8%) oli perinuclear halo suggestiveof T. vaginalis, kun taas organismit nähtiin vuonna 15 (5%) heistä. 30 (10%) näytekappaleista on sekä T. vaginalis että perinukleaarinen sädekehä., Märkä valmisteet alla valo mikroskoopin, 36(12%) näytteistä oli T. vaginalis.

Taulukko 2 Prosenttiyksikköä herkkyys verrattuna kulttuuri-ja PCR –

Kun verrataan myönteisiä tuloksia, kulttuuri-ja PCR -, märkä valmistelut oli highestsensitivity ja 81.58% seuraa 65.77% diagnoosi perustuu perinuclear halo ja T. vaginalis. Todennäköinen diagnoosi perustuu perinuclear halo yksin oli 52.63%, kun diagnosisbased tunnistamista organismien Papa oli 42.,11%

Keskustelua

Papanicolaou on paras värjäys menetelmä sytologia, koska se auttaa tehokkaasti differentiatemalignant soluja ei-pahanlaatuisia soluja. Se tahraa myös sytoplasman ja sen sisällön . Itsability erottaa acidophilic materiaaleja emäksiset aineet sekä sen kyky tostain ei-huokoiset aineet, kuten fibriinin, kiteet ja pigmentit, tekee se olennainen tahra sytologia . T. vaginalis, trikomoniaasin aiheuttava organismi on yleisin sukupuoliteitse tarttuva organismi maailmanlaajuisesti ., Se parasitizes sekä miehillä ja femaleswhere se on joskus oireeton alkuvaiheessa infektio. T. vaginalis-infektio satavuotiaita pelata rooli kehityksen kohdunkaulan neoplasia, leikkauksen jälkeisiä infektioita, ja adversepregnancy tuloksia ja tekijä epätyypillinen lantion tulehduksellinen sairaus ja hedelmättömyys .Siellä on myös epidemiologisia ja kokeellisia todisteita siitä, että Papa-ovat hyödyllisiä indetecting infektioita, jotka ovat liittyvät riskitekijät kohdunkaulan syövän, kuten humanpapilloma virus . Trikomoniaasin diagnosoinnissa on useita menetelmiä., On helpoimmantodia, johon kuuluu märkävalmisteen tutkiminen mikroskoopilla, jossa organisaation nähdään liikkuvan nopeasti kaikkiin suuntiin. Muita menetelmiä ovat yöpymisviljely, nopea antigeenitestaus ja transkriptiovälitteinen vahvistus sekä PCR .Papa preparaatti on rutiiniseulontatesti, jota käytetään kohdunkaulan poikkeavuuksien ja kohdun kohdunkaulan dysplastisten muutosten havaitsemiseen . Se myös havaitsee tiettyjä virus -, bakteeri-ja sieni-infektioita kohdunkaula ja emätin ., Tässä kokeessa, märkä valmisteet ofcervical ja emättimen tahroja ja Papanicolaou värjätään tahroja tutkittiin ja vertailtiin withresults saatu PCR-7 päivän jälkeen kulttuuri. Läsnäolo perinuclear halo epithelialcells käytettiin todennäköinen diagnoosi T. vaginalis. Pap-smears ei ole parempi kuin märkäpreparaatiot T. vaginaliksen havaitsemisessa, kuten taulukoissa 1 ja 2 esitetään. Kulttuuri on hyvinherkkä menetelmä havaita T. vaginalis, mutta se on kallista ja aikaa vievää. Se on tiivistetty, että kun taas T., vaginalis pitäisi olla raportoitu kohdunkaulan ja emättimen Papa-kokeilla, sen puuttuminen thesesmears ei ole osoitus absoluuttinen puuttuminen organismin potilaan.