Articles

Vérplazma versus szérum: melyik a megfelelő a keringő membrán mikrovezikulumok mintavételéhez emberi alanyokban? | Annals of a Reumás Betegségek

  • membrán microvesicles
  • szérum
  • plazma
  • véralvadási
  • lupus

Mi olvastam nagy érdeklődéssel a cikk által Kato pedig a kollégák tekintetében a ‘Apoptózis eredetű membrán hólyagok vezetni a cGAS–STING út, valamint fokozza típusú IFN termelés szisztémás lupus erythematosus’.,1 Azonban aggódunk, hogy a szerzők vizsgálták kizárólag a vér szérum, hogy az összes vért vett, hogy a betegek lupus, egészséges kontrollok volt alvadt ex vivo elemzés előtt.

legalább három fő változás fordulhat elő a membránmikrovezikulumok (MVs) populációjában a kémcsőben történő koaguláció során. Először is, a keringő MVs egy részhalmaza vesz részt a véralvadásban, és elfogyasztja azt., Például csoportunk és mások által végzett vizsgálatok azt mutatták, hogy a vérplazma2 vagy az in vitro generált MVs3 4 teljes membrán MVs-jének több mint fele foszfatidil-szerint (PS) mutat a felületükön. A PS-pozitív MVs prokoaguláns azokhoz képest, amelyek PS negatívak2 3 5 mivel a PS katalitikus membránfelületet képez, amely elősegíti a koagulációs faktor komplexek összeszerelését és katalízisét.3 6 különösen igaz az apoptotikus MVs-re,3 5 7 8 Mivel a PS membrán felületi expozíciója a sejt apoptózisának fémjelzése.,9 így a PS-pozitív MVs előnyben részesíthető a vérrög képződésében a mintavevő csőben, ha véralvadásgátlók nélkül vért vonnak. A szérumcsőben lévő fennmaradó MVs nem lehet reprezentatív a forgalomban lévő MVs eredeti populációjára.4

a véralvadási ex vivo során a második változás az olyan új MVs populáció kialakulása, amelyet eredetileg nem mutattak be a keringésben. A vérlemezkék a kémcsőben kialakuló vérrögképződés során aktiválódnak, és a mintavételi folyamat során in vitro mesterségesen előállított MVs-eket bocsátanak ki.,A mintacsőben előállított 10 thrombocyta-eredetű MVs a szérumban lévő MVs 50% – át teszi ki.10 a vérben lévő egyéb sejtek is felszabadíthatják az MVs-t az ex vivo véralvadás során. Ezek a szérumban található “mesterséges” MVs-ek nem reprezentálják a keringő vér patofiziológiai állapotát lupusos és egészséges kontrollos betegeknél.

a véralvadás során bekövetkező harmadik változás a fehérjék MVs-re történő lehetséges hasítása proteázokkal, azaz trombinnal, amely a koagulációs kaszkád során keletkezik. Ezt a problémát nem vizsgálták széles körben az MV kutatási területén, de más területeken is ismert., Például a trombin az apolipoprotein-B-t fragmensekké emészti,a 11-et és az ” ép ” lipoproteineket a plazmából izolálják, nem pedig a szérumból.

véleményünk szerint az antikoagulánsok jelenlétében elkészített vérplazma12-t az MV-kutatásokban kell alkalmazni, mivel elkerüli az “eredeti keringő” MVs fogyasztását, valamint a “mesterséges” MVs előállítását, valamint a proteázoknak való kitettséget a szérum mintacsövekben ex vivo véralvadás során. A Kato et al és más csoportok által alkalmazott szérummal végzett vizsgálati eredményeket azonban vérplazmával kell megerősíteni., A kémcsőben a vér alvadása által okozott leletek nagymértékben befolyásolhatják a keringő membránmvs-ek klinikai transzlációs vizsgálatok eredményeit és következtetéseit. Ezért a keringő membrán MVs vérmintavétele emberi alanyokban fontos pont, amelyet tisztázni kell a klinikai transzlációs kutatásokat végző kutatók körében.

    1. Kato Y,
    2. Park J,
    3. Takamatsu H, et al

    ., Az apoptózisból származó membránhólyagok vezetik a cGAS-STING utat, és fokozzák az I. típusú IFN termelést a szisztémás lupus erythematosusban. Ann Rheum Dis 2018; 77: 1507–2015.doi:10.1136/annrheumdis-2018-212988

    1. Shet AS,
    2. Aras O,
    3. Gupta K, et al

    . A sarló vér endothel sejtekből és monocitákból származó szöveti faktor-pozitív mikrorészecskéket tartalmaz. Vér 2003;102: 2678-83.doi: 10.1182 / vér-2003-03-0693

    1. li M-L,
    2. Reilly MP,
    3. Casasanto P, et al

    ., A humán monocita/makrofágok koleszterin-dúsítása foszfatidil-szerin felületi expozícióját és biológiailag aktív szöveti faktor-pozitív mikrovezikulumok felszabadulását indukálja. Arterioscler Thromb Vasc Biol 2007;27:430-5.doi:10.1161 / 01.ATV.0000254674.47693.e8

    1. Latham SL,
    2. Tiberti N,
    3. gokoolparsadh N, et al

    . A mikrorészecskék Immuno-analízise: tapintás a kimutatás határain. Kjt 2015; 5.doi: 10.,1038 / srep16314

    1. li M,
    2. Yu D,
    3. Williams kj, et al

    . A dohányfüst indukálja a prokoaguláns mikrovezikulumok kialakulását az emberi monocitákból / makrofágokból. Arterioscler Thromb Vasc Biol 2010;30:1818-24.doi: 10.1161 / ATVBAHA.110.209577

    1. Zwaal RFA,
    2. Comfurius P,
    3. Bevers EM

    . A foszfatidil-szerin felületi expozíciója kóros sejtekben. Cell Mol Life Sci 2005; 62: 971-88.doi: 10.,1007 / s00018-005-4527-3

    1. Casciola-Rosen L,
    2. Rosen a,
    3. Petri M, et al

    . Az apoptotikus sejteken a felszíni bleb-k fokozott prokoaguláns aktivitás helyszínei: a koagulációs eseményekre gyakorolt hatások és a szisztémás lupus erythematosusban az antigén terjedés. Proc Natl Acad Sci U S A 1996;93:1624-9.doi: 10.1073 / pnas.93.4.1624

    1. Stampfuss JJ,
    2. Censarek P,
    3. Bein D, et al

    ., A membránkörnyezet, nem pedig a szöveti faktor expressziója határozza meg az apoptózis alatt álló monocitikus sejtek által kiváltott trombinképződést. J. Biol 2008;83: 1379-81.doi:10.1189 / jlb.1207843

    1. Balasubramanian K,
    2. Mirnikjoo B,
    3. Schroit aj

    . A foszfatidil-szerin szabályozott externalizációja a sejtfelszínen: az apoptózis következményei. J Biol Chem 2007;282: 18357-64.doi:10.1074 / jbc.M700202200

    1. Witwer KW,
    2. Buzás EI,
    3. Bemis LT, et al

    ., A mintagyűjtési, izolációs és elemzési módszerek szabványosítása az extracelluláris vezikulumkutatásban. Jockey 2013; 2. doi:doi: 10.3402 / jev.v2i0.20360

    1. Cardin AD,
    2. Witt KR,
    3. Chao J, et al

    . A humán plazma kis sűrűségű lipoprotein B-100 apolipoproteinjének szöveti és plazma kallikrein általi lebomlása. J Biol Chem 1984;259: 8522-8.

    1. li M,
    2. Xu H,
    3. Bashir M, et al

    ., Proinflammatorikus mikrovezikulumok bőr lupus erythematosusban szenvedő betegeknél. J Invest Dermatol 2014; 134.