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Abbiamo letto con grande interesse l’articolo di Kato e colleghi per quanto riguarda la ” Apoptosi-derivati di vescicole di membrana in auto la cGAS–STING percorso e valorizzare tipo di produzione di IFN nel lupus eritematoso sistemico’.,1 Tuttavia, siamo preoccupati che gli autori abbiano studiato esclusivamente siero di sangue, cioè tutti i campioni di sangue dei loro pazienti con lupus e controlli sani sono stati coagulati ex vivo prima dell’analisi.

Almeno tre cambiamenti importanti possono accadere alla popolazione delle microvescicole della membrana (MVs) durante la coagulazione in una provetta. In primo luogo, un sottoinsieme di MVS circolanti partecipa e viene consumato dalla coagulazione., Ad esempio, gli studi del nostro gruppo e di altri hanno indicato che oltre la metà del MVs di membrana totale nel plasma2 del sangue o il MVs3 4 generato in vitro mostrano fosfatidilserina (PS) sulla loro superficie. I MVS PS-positivi sono procoagulanti rispetto a quelli che sono PS negativi2 3 5 perché PS forma una superficie di membrana catalitica che promuove l’assemblaggio e la catalisi dei complessi dei fattori della coagulazione.3 6 È particolarmente vero per i MVs apoptotici, 3 5 7 8 poiché l’esposizione superficiale della membrana del PS è un segno distintivo dell’apoptosi cellulare.,9 Pertanto, i MVS PS-positivi potrebbero essere coinvolti preferenzialmente nella formazione di coaguli nella provetta di campionamento quando il sangue viene prelevato senza anticoagulanti. I restanti MVs nel tubo sierico potrebbero non essere rappresentativi della popolazione originale di MVs che erano in circolazione.4

Un secondo cambiamento durante la coagulazione ex vivo è la generazione di nuova popolazione di MVs che non sono stati originariamente presentati in circolazione. Le piastrine si attivano durante la formazione di coaguli in una provetta e rilasciano MVs generati artificialmente in vitro durante il processo di campionamento.,10 MVs derivati dalle piastrine generati nella provetta del campione possono rappresentare il 50% dei MVs nel siero.10 Altre cellule nel sangue possono anche rilasciare MVs durante la coagulazione ex vivo. Questi MVS ‘artificiali’ nel siero non possono rappresentare la condizione fisiopatologica del sangue circolante in pazienti con lupus e controlli sani.

Un terzo cambiamento durante la coagulazione è la possibile scissione delle proteine su MVs da parte delle proteasi, cioè la trombina, generata durante la cascata della coagulazione. Questo problema non è stato ampiamente studiato nel campo della ricerca MV, ma è noto in altri campi., Ad esempio,la trombina digerisce l’apolipoproteina-B in frammenti, 11 e le lipoproteine “intatte” sono isolate dal plasma, non dal siero.

A nostro avviso, il plasma12 del sangue preparato in presenza di anticoagulanti – dovrebbe essere usato nella ricerca MV perché evita il consumo del MVS ‘originale circolante’ e la produzione del MVs ‘artificiale’, così come l’esposizione alle proteasi, durante la coagulazione ex vivo nelle provette del campione di siero. Ma i risultati dello studio con siero, come usato da Kato et al e altri gruppi, dovrebbero essere confermati con plasma sanguigno., Gli artefatti causati dalla coagulazione del sangue in una provetta possono influenzare in gran parte i risultati e le conclusioni di qualsiasi studio di MVs di membrana circolante nelle indagini traslazionali cliniche. Pertanto, il prelievo di sangue della membrana circolante MVs in soggetti umani è un punto importante che deve essere chiarito tra gli investigatori che conducono ricerche traslazionali cliniche.