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Semi-Conservativa Replica

Il Meselson – Stahl esperimento: La prova di semi-conservativa replica

Meselson & Stahl, divenne batteri per diverse generazioni in un mezzo contenente solo 15N (“pesante” di azoto). Se esaminato in una centrifuga analitica, il DNA isolato da questi batteri ha prodotto una singola banda “pesante”., Meselson& Stahl ha quindi trasferito una parte della coltura in un nuovo mezzo che conteneva solo 14N (azoto” leggero”). Quando il DNA è stato isolato da questi batteri dopo una generazione, hanno osservato una singola banda che era “più leggera” di quella ottenuta prima; la banda “pesante” non è stata osservata in questi batteri. Quando il DNA è stato isolato dalla stessa cultura dopo due generazioni, hanno osservato due bande distinte di uguale intensità, uno con lo stesso peso visto nell’esperimento precedente, e uno nuovo ancora “più leggero.,”Quando il DNA è stato isolato dalla stessa cultura dopo tre generazioni, questa banda più leggera è diventata quella predominante e la banda centrale è svanita.

Meselson & Stahl ragionò che questi esperimenti mostravano che la replicazione del DNA era semi-conservativa: i filamenti di DNA si separano e ciascuno fa una copia di se stesso, in modo che ogni molecola figlia comprenda un “vecchio” e un “nuovo” filamento. I batteri coltivati in azoto ” pesante “sono stati etichettati su entrambi i fili interamente con azoto” pesante”., Dopo una generazione in azoto “leggero”, tutte le molecole di DNA comprendono un filamento” vecchio pesante “e uno” nuovo leggero “e hanno lo stesso peso molecolare” pesante / leggero”, che è inferiore a quello delle molecole” pesanti / pesanti”. Dopo due generazioni in mezzo “leggero”, i fili “pesante” e “leggero” si separano ed entrambi si replicano con azoto “leggero”. Metà diventa quindi ” luce / luce “e metà diventa” pesante / luce ” come nell’esperimento precedente. In ogni generazione successiva, la proporzione di fili “pesanti “si riduce della metà e la banda” pesante / leggera” svanisce gradualmente.,

Homework:
1) Ti aspetti che il filo di banda più leggero diventi ancora più leggero con ulteriori generazioni di replica? Spiegare.
2) Supponiamo che la replicazione del DNA fosse “conservativa”: i fili genitori si separano, ognuno fa una copia di se stesso, e i due nuovi fili figlia si uniscono come una nuova molecola e i vecchi fili genitori si ricongiungono. Prevedere i risultati dell’esperimento Meselson – Stahl.