ヨーロッパ実験生物学ジャーナル
キーワード
Papanicolaou塗抹標本、Trichomonas vaginalis、顕微鏡
はじめに
Trichomonas vaginalisは鞭毛原虫であり、Trichomonaisisを引き起こし、世界中で最も一般的な治癒可能な性感染症である。 ヒトパピローマウイルスとは別に、トリコモナス症は、米国で最も一般的な性感染症です今日の状態。 女性と男性の両方の間で、Tの協会。, ヒトを伴う膣免疫不全獲得および伝達は、いくつかの研究で示されている。 Inwomen、トリコモナス症は頚部腫瘍、postoperative伝染および不利な妊娠の結果の開発のそして非定型の骨盤のinflammatorydiseaseおよび不妊の要因として役割を担うかもしれません。 人では、トリコモナス症はnongonoccocalurethritisの原因と男性の要因の不妊に貢献として現れました。 最も一般的な方法の診断は、75-95％の感度範囲を有する一晩培養によるものである。, 迅速な抗原検査および転写媒介性増幅などの方法も使用されており、より高い感度を有すると言われているが、広く使用されていない。 T.vaginalisの存在GENBANK/L23861に特異的なプライマーを用いてPCRによって診断することもできる。 Pap塗抹標本は、子宮頸部の異常および子宮頚部の前癌異形成変化の検出に使用されるルーチンスクリーニング試験である。 また、子宮頸部および膣の特定のウイルス、細菌、および真菌感染を検出します。, Pap塗抹標本は、ヒトパピローマウイルスなどの子宮頸癌に関連する危険因子である感染症の検出に有益であるという疫学的および実験的証拠もある。 頚部およびちつ標本におけるＴｒｉｃｈｏｍｏｎａｓｖａｇｉｎａｌｉｓの検出におけるＰａｐ塗抹標本の適用性を決定することを目的とした。,
材料および方法
顕微鏡のために送られた綿毛先端アプリケーターで三百頸部および膣標本は、同時に、従来のPapanicolaou法、培養および南部および西部のナイジェリアのいくつかの病院におけるTrichomonas vaginalisの存在のためのPCRによって調べた。
Papanicolaou法
各試料をきれいなグリースフリースライドに塗りつぶし、エーテルアルコールで30分間固定した。, 標本は次のようにPapanicolaou法によって染色された：Harris’shaematoxylin酢酸なしで5分間、水道水ですすぎ、1％acidalcoholで30秒間分化し、Scott’s waterで2分間染色された。 塗抹標本を95％アルコールに取り、OG6で2分間染色し、95％アルコールですすぎ、EA35で2分間染色した。 その後、スミアは絶対アルコール、キシレンおよびinDPXの二つの変化に取り込まれた。, 染色した塗抹標本を光学顕微鏡下でＴｒｉｃｈｏｍｏｎａｓｖａｇｉｎａｌｉｓと核周囲ハローの存在について低パワーおよび高パワー対象で調べた。
湿式調製物の検査
各綿毛チップアプリケータは、その後、約2mlの通常の生理食塩水を含む試験管ですすいだ。 内容物をきれいなガラススライド上に注ぎ，光顕下で急速に移動する生物の存在を調べた。
t.vaginalisの培養
培養培地および培養の調製
Kupferberg Trichomonas培地は、23を溶解することにより調製した。,Kupferbergtrichomonasベース（QUELAB、カナダ）の5gは、熱の助けを借りて蒸留水950mlで、オートクレーブで15分間滅菌し、15Ib圧力（121℃）で冷却した。 加熱活性化された50ml（55-60℃）ウシ血清を加えた。 抗生物質（ペニシリンGおよびストレプトマイシン）およびアンチフンガル（アンホテリシンB）を混合物に添加し、4℃で保存した。 約15mlのテメジウムを培養チューブに入れ、37℃に15分間加熱した。 子宮頸部および膣の綿棒を培地に入れ、37℃で7日間インキュベートした後、顕微鏡的に検査した。, 培地を滅菌リン酸緩衝生理食塩水（PBS）pH7.2で二回洗浄し、DNA抽出に供した。
DNA抽出、プライマーおよびPCR
培養物をph7.2の滅菌リン酸緩衝生理食塩水で二回洗浄し、400μl T/E緩衝液中に懸濁した。 ＤＮＡ抽出はＳＤＳを用いて行い，プロテイナーゼＫに続いてｂｙｃｔａｂ／Ｎａｃｌを用いて行った。 ＤＮＡの存在を、Ｐｃｒａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎの前に電気泳動によって確認した。 Tに基づくプライマー, 膣DNAを使用して300bpのゲノム片（TIB MOLBIOL、Germany）を増幅し、PCR反応を自動化された熱サイクラー（Eppendorf master cycler gradient）を使用して行った。
結果
表1Papスミア、湿式調製およびPCR
Pap技術によって調べられた300標本のうち、24（8％）はT.vaginalisの核周囲ハローを示唆していたが、生物は15（5％）で見られた。 標本の30(10%)T.vaginalisと核周囲ハローの両方を覆っていました。, 光学顕微鏡下での湿式調製物では、標本の36（12％）はt.vaginalisを有していた。
表2培養およびPCRと比較した感度の割合
培養およびPCRの陽性結果と比較した場合、湿式製剤は81.58％の最も高い感度を有し、核周囲ハローおよびt.vaginalisに基づく診断の65.77％が続いた。 核周囲ハローのみに基づく推定診断は52.63％であったが、Pap塗抹標本における生物の同定に基づく診断は42であった。,11%
パパニコラウは細胞診において最も優れた染色方法であり、非悪性細胞から悪性細胞を効果的に分化させるのに役立つ。 それはまた、細胞質およびその内容物を汚す。 Acid性物質と好塩基性物質を区別する能力、およびフィブリン、結晶および色素などの非細胞性物質を含む能力は、細胞学において必須の染色である。 T.vaginalisは、トリコモナス症のための原因となる有機体commoncurable性に送信される有機体世界的です。, それは男性と女性の両方に寄生します感染の初期段階では時には無症候性です。 T.vaginalisの伝染は頚部新生物、postoperative伝染およびadversepregnancyの結果の開発の役割を担うためにそして非定型の骨盤の炎症性病気および不妊の要因としてissaid。また、pap塗抹標本がヒトパピローマウイルスのような子宮頸がんに関連する危険因子である検出感染症で有益であるという疫学的および実験的証 トリコモナス症の診断のいくつかの方法が存在する。, Theorganismsがすべての方向で急速に動くことを見られる顕微鏡下でぬれた準備の検査を含むeasiestmethodがあります。 他の方法には、一晩培養、迅速な抗原検査、および転写媒介性増幅およびＰＣＲによるものが含まれる。Papの汚れは頚部異常のandprecancerous dysplastic子宮頚部の変更の検出に使用する定期的なスクリーニングテストです。 また、子宮頸部および膣の特定のウイルス、細菌、および真菌感染症を検出します。, この実験では、子宮頸部および膣塗抹標本およびPapanicolaou染色塗抹標本の湿式調製物を調べ、7日間の培養後にPCRから得られた結果と比較した。 Ｔ．ｖａｇｉｎａｌｉｓに対する推定診断として，上皮細胞中の核周囲ハローの存在を用いた。 Pap塗抹標本は、表1および2に示すように、t.vaginalisの検出における湿式準備よりも優れていない。 培養はt.vaginalisを検出する非常に敏感な方法ですが、それは高価で時間がかかります。 それはTながらそれを締結されています。, 膣は子宮頸部および膣Pap塗抹標本で報告されるべきであり、これらの中にその不存在感は、患者の生物が絶対に存在しないことを示すものではない。
