palavras-chave

Papanicolaou smears, Trichomonas vaginalis, microscopia

introdução

Trichomonas vaginalis é um protozoário flagelado que causa Trichomonaisis e é a doença sexualmente transmissível mais comum em todo o mundo . Além do vírus humano, a tricomoníase é a infecção sexualmente transmissível mais comum nos Estados Unidos. Entre mulheres e homens, a associação de T., vaginalis com aquisição e transmissão de imunodeficiência humana foi demonstrada em vários estudos . Na mulher, a tricomoníase pode desempenhar um papel no desenvolvimento da neoplasia cervical, infecções pós-operatórias e resultados adversos da gravidez e como um factor na inflamação pélvica atípica e na infertilidade. Nos homens, a tricomoníase surgiu como causa da nongonococaluretrite e como contribuição para a infertilidade masculina . O método mais comum de diagnóstico é a cultura overnight com uma sensibilidade de 75-95% ., Métodos, tais como testes de antígeno e amplificação mediada por transcrição, também foram usados e dizem que têm maior sensibilidade, mas não estão em uso generalizado . A presença de T. vaginalis também pode ser diagnosticada pela PCR, usando primers específicos para GENBANK / L23861 . O esfregaço de Pap é um teste de rastreio de rotina utilizado para a detecção de anomalias cervicais e alterações pré-cancerosas esplásicas do colo uterino . Ele também detecta certas infecções virais, bacterianas e fungal do colo do útero e vagina ., Existem também provas epidemiológicas e experimentais de que os esfregaços de Pap são benéficos na detecção de infecções que são factores de risco associados ao cancro do colo do útero, como o vírus do papiloma humano . O objectivo deste estudo era determinar a adequabilidade do esfregaço Pap na detecção de Trichomonas vaginalis em amostras do colo do útero e vaginal.,

materiais e métodos

trezentos espécimes cervicais e vaginais em aplicadores com ponta de algodão que foram enviados para microscopia foram simultaneamente examinados pelo método Papanicolau convencional,pela cultura e pela PCR para a presença de Trichomonas vaginalis em alguns hospitais no sul e oeste da Nigéria.o método Papanicolaou cada espécime foi manchado numa lâmina isenta de gordura limpa e fixado em éter-álcool durante 30 minutos., Os espécimes foram então manchados pelo método Papanicolaou do seguinte modo: Harris ‘ shaematoxilina sem ácido acético por 5 minutos, enxaguado em água da torneira e diferenciado em 1% de acidalcool por 30 segundos e azul na água de Scott por 2 minutos. Os esfregaços foram tomados a 95% de álcool e manchados em OG6 durante 2 minutos, enxaguados em 95% de álcool e manchados em EA 35 durante 2 minutos. Os esfregaços foram então levados a duas alterações de álcool absoluto, xileno e inDPX montado., Os esfregaços manchados foram examinados sob o microscópio de luz em objetos de baixa e alta potência para a presença de Trichomonas vaginalis e halo perinuclear.cada aplicador com ponta de algodão em lã foi subsequentemente enxaguado num tubo de ensaio contendo cerca de 2 ml de solução salina normal. O conteúdo foi vertido sobre uma lâmina de vidro limpa e examinado sob o microscópio de luz para a presença de um organismo em movimento rápido.preparação do meio de cultura e do meio de cultura Kupferberg Trichomonas foi preparado por dissolução 23.,5g da Base de KupferbergTrichomonas (QUELAB, Canadá) em 950 ml de água destilada com auxílio de calor,esterilizada numa autoclave durante 15 minutos à pressão de 15 Ib (121°C) e arrefecida. Adicionaram-se 50 ml de soro bovino inactivado (55-60°C). Os antibióticos (penicilina G e estreptomicina) andantifungal (anfotericina B) foram adicionados à mistura e armazenados a 4ºC. Cerca de 15 ml de temedium foi colocado em um tubo de cultura e aquecido a 37 ° C durante 15 minutos. As amostras cervicais e vaginais foram colocadas no meio e incubadas a 37ºC durante 7 dias após o que foram examinadas microscopicamente., O meio foi lavado duas vezes em solução salina estéril de tampão fosfato (PBS)pH7.2 e submetido a extracção de ADN.as culturas foram lavadas duas vezes em tampão fosfato estéril salino a pH7. 2 e tampão in400µl T/E. A extracção do ADN foi realizada utilizando SDS e proteinase K seguida de byCTAB / NaCl. A presença de ADN foi confirmada pela electroforese antes da Pcramplificação. Iniciadores baseados em T., DNA vaginalis foram usados para amplificar um pedaço de genoma de 300 bp (TIB MOLBIOL, Alemanha), enquanto a reação PCR foi realizada usando o ciclador termal automatizado (Eppendorf master cycler gradient).

Resultados

Tabela 1 Papanicolau, molhado e preparação do PCR

De 300 espécimes examinados pelo Pap técnica, 24 (8%) tinha halo perinuclear suggestiveof T. vaginalis, enquanto os organismos foram vistos em 15 (5%) deles. 30 (10%) dos espécimes tinham tanto o “T. vaginalis” como o “perinuclear halo”., Em preparações molhadas ao microscópio de luz, 36 (12%) dos espécimes apresentavam T. vaginalis.

Tabela 2 Porcentagem de sensibilidade em comparação com a cultura e a PCR

Quando comparado com os resultados positivos da cultura e PCR, molhado preparações tinha o highestsensitivity de 81.58%, seguido por 65.77% de diagnóstico baseado em halo perinuclear e T. vaginalis. O diagnóstico presumível baseado apenas no halo perinuclear foi de 52,63%, enquanto o diagnóstico baseado na identificação de organismos no esfregaço Pap foi de 42.,11%

discussão

Papanicolaou é o melhor método de coloração na citologia, porque ajuda a efetivamente diferenciar as células malignas das células não malignas. Também mancha o citoplasma e o seu conteúdo . A sua capacidade de diferenciar os materiais acidófilos dos materiais basófilos, bem como a sua capacidade de deter substâncias não celulares como a fibrina, cristais e pigmentos, torna-a uma mancha essencial na citologia . T. vaginalis, o organismo causador da tricomoníase é o organismo sexualmente transmissível mais comum em todo o mundo ., Parasita ambos os machos e as fêmeas onde às vezes é assintomática nos estágios iniciais da infecção. A infecção por T. vaginalis deve desempenhar um papel no desenvolvimento da neoplasia cervical, infecções pós-operatórias e resultados de gravidez adversa e como factor na doença inflamatória pélvica atípica e na infertilidade .Existem também provas epidemiológicas e experimentais de que os esfregaços de Pap são benéficos Ao identificar infecções que são factores de risco associados ao cancro do colo do útero, como o vírus doapiloma humano . Existem vários métodos de diagnóstico de tricomoníase., Há o método easiest que envolve o exame de uma preparação húmida sob o microscópio, onde osorganismos são vistos movendo-se rapidamente em todas as direcções. Outros métodos incluem a cultura noturna, testes rápidos de antígenos, e amplificação mediada por transcrição e por PCR .O esfregaço Pap é um teste de rastreio de rotina utilizado para a detecção de anomalias cervicais e alterações displásicas pré-cancerosas do colo uterino . Ele também detecta certas infecções virais,bacterianas e fúngicas do colo do útero e vagina ., Nesta experiência, examinaram-se e compararam-se os preparados húmidos de esfregaços corados corados de Papanicolaou com os resultados obtidos a partir da PCR após 7 dias de cultura. A presença de halo perinuclear nas células epiteliais foi usada como um diagnóstico presuntivo para T. vaginalis. Os esfregaços de Pap não são superiores às preparações húmidas na detecção de T. vaginalis, como indicado nos quadros 1 e 2. A cultura é um método muito sensível de detecção de T. vaginalis, mas é caro e demorado. Conclui-se que, enquanto T., a vaginalis deve ser notificada em esfregaços de Pap vaginal e cervical, a sua ausência nestes medidores não constitui uma indicação da ausência absoluta do organismo no doente.