cuvinte Cheie

frotiuri Papanicolau, Trichomonas vaginalis, microscopie

Introducere

Trichomonas vaginalis este un protozoar flagelat care provoacă Trichomonaisis și este cel mai comun vindecabile boli cu transmitere sexuală la nivel mondial . În afară de humanpapillomavirus, trichomoniaza este cea mai frecventă infecție cu transmitere sexuală în Statele Unite astăzi. În rândul femeilor și bărbaților, Asociația T., vaginalis cu omachiziția și transmiterea imunodeficienței au fost demonstrate în mai multe studii . La femei, trichomoniaza poate juca un rol în dezvoltarea neoplaziei cervicale, a infecțiilor postoperatorii și a rezultatelor adverse ale sarcinii și ca factor în inflamația pelvină atipicăboala și infertilitatea. La bărbați, trichomoniaza a apărut ca o cauză a nongonococaluretritei și ca contribuind la infertilitatea factorului masculin . Cea mai frecventă metodă de diagnostic este prin cultură peste noapte cu un interval de sensibilitate de 75-95% ., Metode, cum ar asrapid antigen de testare și de transcriere mediată de amplificare, de asemenea, au fost folosite și sunt saidto au o sensibilitate mai mare, dar nu sunt folosite pe scară largă . Prezența lui T. vaginalis poatede asemenea, să fie diagnosticat prin PCR, folosind primeri specifici pentru GENBANK/L23861 . Frotiul Papanicolau esteun test de screening de rutină utilizat pentru detectarea anomaliilor cervicale și a modificărilor precanceroasedisplazice ale colului uterin . De asemenea, detectează anumite infecții virale, bacteriene și fungiceinfecții ale colului uterin și vaginului ., Există, de asemenea, epidemiologice și experimentale dovadă frotiuri Papanicolau sunt benefice în detectarea infecțiilor, care sunt factorii de risc asociați cu cervicalcancer, cum ar fi virusul papilloma uman . Scopul acestui studiu a fost de a determina adecvarea frotiului Papanicolau în depistarea Trichomonas vaginalis la probele cervicale și vaginale.,trei sute de specimene cervicale și vaginale în aplicatoare cu vârf de vată care au fost trimise pentru microscopie au fost examinate simultan prin metoda convențională Papanicolaou,cultura și prin PCR pentru prezența Trichomonas vaginalis în unele spitale din sudul și vestul Nigeriei.metoda Papanicolaou fiecare probă a fost pătată pe o lamelă curată fără grăsimi și fixată în eter-alcool timp de 30 de minute., Probele au fost apoi colorate prin metoda Papanicolaou, după cum urmează: Harris’shaematoxylin fără acid acetic timp de 5 minute, se clătește în apă de la robinet și diferențiate în 1% acidalcoholfor 30 de secunde și blued în Scott apă timp de 2 minute. Smearurile au fost luate la alcool 95% și colorate în OG6 timp de 2 minute, clătite în alcool 95% și colorate în EA 35 timp de 2 minute. Frotiurile au fost apoi luate la două modificări ale alcoolului absolut, xilen și indpx montat., Frotiurile colorate au fost examinate sub microscopul luminos la putere mică și mareobiective pentru prezența Trichomonas vaginalis și halo perinuclear.examinarea preparatului umed fiecare aplicator cu vârf de vată a fost clătit ulterior într-o eprubetă care conține aproximativ 2 ml soluție salină normală. Conținutul a fost turnat pe o lamelă de sticlă curată și examinat sub luminămicroscop pentru prezența unui organisme în mișcare rapidă.cultura T. vaginalis prepararea mediului de cultură și a culturii Kupferberg Trichomonas mediu a fost preparat prin dizolvarea 23.,5G din Baza KupferbergTrichomonas (QUELAB, Canada) în 950 ml de apă distilată cu ajutorul căldurii,sterilizată într-o autoclavă timp de 15 min la presiune 15 Ib (121°C) și răcită. S-au adăugat 50 ml ser de bovine heatinactivated (55-60°C). Antibiotice (penicilină G și streptomicină) șiantifungice (amfotericină B) au fost adăugate la amestec și depozitate la 4ºC. Aproximativ 15 ml dinmediu a fost pus într-un tub de cultură și încălzit la 37°C timp de 15 min. Tampoanele cervicale și vaginale au fost plasate în mediu și incubate la 37ºC timp de 7 zile după care au fost examinate microscopic., Mediul a fost spălat de două ori în soluție salină sterilă tamponată cu fosfat (PBS)pH7.2 și supusă extracției ADN.culturile au fost spălate de două ori în soluție salină sterilă tamponată cu fosfat la pH7.2 și suspendate în tampon de 400µl t/E. Extracția ADN – ului a fost efectuată utilizând SDS și proteinaza K urmată dectab/NaCl. Prezența ADN-ului a fost confirmată prin electroforeză înainte de Pcramplificare. Grunduri bazate pe T., vaginalis ADN-ul au fost folosite pentru a amplifica un 300 bp bucată ofgenome (TIB MOLBIOL, Germania), în timp ce reacția PCR a fost realizată cu ajutorul automatedthermal cycler (Eppendorf master cycler gradient).

Rezultate

Tabelul 1 testul Papanicolau, umed pregătirea și PCR

De 300 de exemplare examinate de către Pap tehnica, 24 (8%) a avut halou perinuclear suggestiveof T. vaginalis în timp ce organismele au fost observate la 15 (5%) dintre ele. 30 (10%) din specimeneau avut atât T. vaginalis, cât și halo perinuclear., În preparatele umede sub microscopul luminos, 36 (12%) din specimene au avut T. vaginalis.

Tabelul 2 Procentul de sensibilitate în comparație cu cultura și PCR

în comparație cu rezultatele pozitive ale culturii și PCR, preparate umede avut highestsensitivity de 81.58%, urmat de 65.77% din diagnostic bazat pe halou perinuclear și T. vaginalis. Diagnosticul prezumtiv bazat numai pe halo perinuclear a fost de 52,63%, în timp ce diagnosticul bazat pe identificarea organismelor în frotiul Papanicolau a fost de 42.,11%

discuție

Papanicolaou este cea mai bună metodă de colorare în citologie, deoarece ajută la diferențierea eficientăcelulele maligne de celulele non-maligne. De asemenea, pătează citoplasma și conținutul acesteia . Capacitatea sa de a diferenția materialele acidofile de materialele bazofile, precum și capacitatea sa de a conține substanțe necelulare, cum ar fi fibrina, cristalele și pigmenții, o face o pată esențială în citologie . T. vaginalis, organismul cauzal pentru trichomoniasis este cel mai frecventcurabil organism cu transmitere sexuală la nivel mondial ., Parazitează atât bărbații, cât și femeileunde este uneori asimptomatic în stadiile incipiente ale infecției. T. vaginalis infecția issaid pentru a juca un rol în dezvoltarea cancerului de col uterin neoplazii, infectii postoperatorii, și adversepregnancy rezultate și ca un factor în atipice de boala inflamatorie pelvina si infertilitate .Există, de asemenea, epidemiologice și experimentale dovezi că testul Papanicolau sunt benefice indetecting infecții, care sunt factorii de risc asociați cu cancerul de col uterin, cum ar fi humanpapilloma virus . Există mai multe metode de diagnosticare a trichomoniasisului., Există cea mai ușoară metodă care implică examinarea unui preparat umed sub microscop, unde se văd organizațiile care se mișcă rapid în toate direcțiile. Alte metode includ cultura peste noapte, testarea rapidă a antigenului și amplificarea mediată de transcripție și prin PCR .Frotiu Papanicolau este un test de screening de rutină utilizat pentru detectarea anomaliilor cervicale șimodificări displazice precanceroase ale colului uterin . De asemenea, detectează anumite infecții virale,bacteriene și fungice ale colului uterin și vaginului ., În cadrul acestui experiment au fost examinate și comparate preparatele umede de frotiuri cervicale și vaginale și frotiuri colorate Papanicolaou cu rezultatele obținute din PCR după cultura de 7 zile. Prezența halo-ului perinuclear în epiteliucelulele au fost folosite ca diagnostic prezumtiv pentru T. vaginalis. Frotiurile de Papanicolau nu sunt superioare umeduluipreparate în detectarea T. vaginalis așa cum se arată în tabelele 1 și 2. Cultura este foartemetoda sensibilă de detectare a T. vaginalis, dar este costisitoare și consumatoare de timp. Se concluzionează că în timp ce T., vaginalis trebuie raportat în frotiuri de Papanicolau cervical și vaginal, absența acestuia în acesteaurechile nu este o indicație pentru absența absolută a organismului la pacient.